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zgzfei

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] 中药单体在大鼠血浆中的代谢产物,LC/PDA/MS检测

我做的是中药异黄酮在大鼠体内代谢,灌胃给药,血浆处理沉淀蛋白和固相萃取都做了,可血浆代谢物在质谱上检不出,只有一个高浓度的代谢产物可以明确检测。选择离子的时候,或者没有峰或者与空白重合。在紫外下经过放大还能看到几个代谢物。有没有哪位高手做过类似的实验,在这里分享下经验吧!
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caicaiseven

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by zgzfei at 2012-05-30 10:54:57
我用的是Q-TOF没加碰撞能的全扫描模式,可能因为刚用条件不会优化
加上前面的分离也不好。请问什么质谱条件会破坏二相代谢产物呢?...

Q-TOF没用过不太了解,我觉得直接用全扫描模式的话,会有很高的背景峰,有可能淹没比较小的代谢物的峰。

我觉得,做代谢物鉴定,应该是先从结构和代谢途径来推一下可能得代谢产物,然后再想办法把这些代谢产物找出来验证。

此外,我听说有个高分辨质谱是有mass shift扫描的,不知道是哪个牌子了 = =  如果恰好是楼主用的那个,可以试试

比较强烈的质谱条件可能破坏二相代谢产物一般是指高温高电压,有些葡萄糖醛酸化的产物有可能被打回一项产物,不过这个要根据化合物情况讨论……
18楼2012-06-04 15:04:10
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992523136

金虫 (正式写手)



zgzfei(金币+1): 谢谢参与
其他的两个浓度,是不是量太低了,可以浓缩在看看一下。或者除蛋白的时候会把你的要的物质除掉。
4楼2012-05-29 17:01:35
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liuguilin

禁言 (文学泰斗)



zgzfei(金币+1): 谢谢参与
没做做!
5楼2012-05-29 17:09:10
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dengyx1968

木虫 (著名写手)


★ ★
zgzfei(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-04 09:15:33
你不是能检测到一个代谢产物嘛,当然黄酮类成分在体内代谢一般不止一个代谢产物,从你的紫外检测也说明了,你的结果说明有几个代谢产物,其中一个代谢产物浓度大,这个就很正常了。你的LC-MS没检测到另外几个,那是说明你的样品处理问题或者你的质谱条件什么的,这个只能你自己解决了。按常规情况,沉淀蛋白有可能把你要测的目标化合物沉淀掉,但你用SPE也没检测到,所以你的质谱条件方面或色谱条件方面可能有问题
6楼2012-05-30 07:35:00
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