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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请问western用的二抗放时间长了或者反复“冻融”的话会有什么后果

我最近在做ip跑western,最后膜用考马斯亮蓝染能染出蛋白,但wb暴不出来,甚至连内参都没有。一抗是公用的,所以怀疑是二抗的问题,请问二抗出问题的几率大吗?
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-23 14:01:54
嗯..................
       二抗应该不会出现冻融吧 不是加有足够的甘油?还是楼主和偶们用的产品不一样............
       提供一个简单的识别方法 请参照偶回答过的帖子
       http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4293764&authorid=1099992
       希望有所帮助
Let God do with it as He wills
2楼2012-05-23 00:27:05
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-23 14:02:05
“最后膜用考马斯亮蓝染能染出蛋白”

这句话是啥意思啊?我咋没看明白呢,你是说转膜之后用考马斯去染吗?我们只有在染胶的时候才会用考马斯亮蓝的,染膜是用丽春红吧,以前做过的,现在转行,不是很记得了。
我建议是考虑一下是否转膜成功,或者转膜时损失太大了,另外你应该把抗体提前分装成小管,用完就不要在用了
3楼2012-05-23 09:18:12
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

二抗是放四度,我的意思是经常四度——室温,所以冻融加了引号
我们实验室膜跟胶都是用考马斯亮蓝染得,能染出来。
之前分了一小管二抗出来,可能时间有点久了,所以担心是不是二抗的原因。回头我换个二抗再试下吧~
4楼2012-05-23 18:33:47
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