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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

我知道如何具体操作,你既然你认为我根本没有做过,那就算了!!!不过,提示你:什么时候存在反应物抑制?如何增大表面积加快反应速度!就说到这里!你有本事自己做吧!我又不欠您的!!
11楼2012-05-22 20:54:47
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by facingworld at 2012-05-22 17:28:49:
你也没有具体操作过吧,我做了很多的,这次是特别,出不来,不过看你这么辛苦的恢复帖子,给你金币吧

我不需要你的金币!你以为单纯地改变试剂浓度,pH,分一分梯度就能凑出来?想想化学反应动力学的基本原理吧。改进有时很容易也很有效,但是如果只知道重复是没有用的!化学热力学只能保证反应能够进行,但是时间是1分钟还是1万年,那是化学反应动力学的任务!
本来我的确觉得我昨天说得太过分了,想给你一些新的Protocols(绝大多数可不是我发明的),不过既然阁下既然认为我连包涵体就没有纯化过,那您就摸索吧。。。
最后一句:假定此种包涵体根本无法在有限时间溶解怎么办?当然有别的办法,不要在表达时形成包涵体不就行了,具体则么做?我不说!因为,您认为我不配回答您的问题,那么我就不回答了。。。祝您好运!
抱歉!前两贴我设成了回帖应助。
12楼2012-05-22 21:05:35
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

你不说我没有纯化溶解过包涵体吗!?就当我是胡说。。。

阁下的溶解包涵体的反应体系对吗!!??别的不提,试剂种类、温度???。。。我都是胡说八道哪!!。。。
13楼2012-05-22 21:19:28
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
14楼2012-05-23 14:45:07
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radium4046

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-24 21:56:56
facingworld: 金币+3, ★★★很有帮助, 我也是这样做的,就是不溶解,不过还是谢谢哈 2012-05-28 09:51:24
首先你要确定是在包涵体中,破碎后沉淀会泛白,并且量很多,SDS会有很大的目的条带,沉淀先用含有edta、triton、DTT的洗液洗两遍,再用2MUrea洗,这样包涵体会纯一些,8M Urea溶解会有杂质,离心去除就行,如果确定8M Urea都不溶解,那换盐酸胍试试
15楼2012-05-23 15:48:25
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547star

木虫 (著名写手)

楼上面那位北大博士,让我想起那位发沈同笔记"上官婉儿"...
为什么
16楼2012-05-23 16:21:45
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zk0604

木虫 (正式写手)

好可怕
17楼2012-05-24 17:37:16
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引用回帖:
10楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-05-22 20:51:51:
我没有具体操作?!那么北京大学的博士学位你说给的!!!!!!!!!?????????本来我今天还想给你多说几句!!!!!!!!!!!!你还挺狂!!!!!!!!!那你就狂吧!!!!!!!!!告诉你:变性

18楼2012-05-24 21:46:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
14楼: Originally posted by facingworld at 2012-05-23 14:45:07:
我做出来了,你不想告诉就不告诉,留着自己慢慢用

文献多的是!你用不着狂!!
19楼2012-05-24 23:58:01
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 547star at 2012-05-23 16:21:45:
楼上面那位北大博士,让我想起那位发沈同笔记"上官婉儿"...

算你猜对了!
20楼2012-05-24 23:58:25
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