24小时热门版块排行榜    

查看: 1380  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shipolande

新虫 (初入文坛)

[求助] 邻苯二酚1,2,邻苯二酚2,3双加氧酶基因扩增遇到大问题·········

本人最近做土壤中细菌邻苯二酚1,2,邻苯二酚2,3双加氧酶基因扩增,想PCR找出目的条带,可是做了好久了一直没有出现目的条带,心情十分郁闷,一直P不出来,模板是土壤总DNA,引物是文献上找的,条件也是参照文献的,就是抑制P不出条带,有哪位大侠做过的,给小弟一点点指点,本人就像做出点东西啊,可是自己知识面有限,经验又少,望大虾们给小弟点提示,在这感激不尽了啊······亲
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

shipolande
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天鸟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
对于功能基因从环境中扩增确实很多时候是扩增不出来的
这和你环境中的该基因的丰度有关,有些基因功能基因很好扩增,而且多样性也不错,如果你环境中该类基因很少的话,它的多样性也可能就是一两个OTU的,你如果你一定要做的话,一个是你可以重复扩增几次,一次不行,可以两次,三次。他们说的富集的方法确实可行的,但可能不是你当初设计试验的初衷。祝好
快乐生活,我快乐
5楼2012-05-24 08:56:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先要用相应的底物富集下微生物吧?
相信自己
2楼2012-05-22 08:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shipolande

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by l68266152 at 2012-05-22 08:37:12:
先要用相应的底物富集下微生物吧?

可是以后做的实验也不是污染土壤,而是种植作物连作土······
shipolande
3楼2012-05-23 10:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by shipolande at 2012-05-23 10:49:55:
可是以后做的实验也不是污染土壤,而是种植作物连作土······

用高保守序列设计兼并引物,买用于扩增痕迹量模板的酶,多看看文献,我不认为能从无特异富集的土壤中扩增出这种酶。。。。
相信自己
4楼2012-05-23 18:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +8 wangyl_123 2026-10-10 12/600 2026-10-13 20:40 by Merryya
[硕博家园] 极限拉扯,如何抉择 +9 Isak0320 2026-10-12 13/650 2026-10-13 11:57 by Isak0320
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +4 好运来~9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见