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fridayalicia新虫 (初入文坛)
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[求助]
求助 MTT！！！
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俺第一次做MTT 出现了很囧的问题 HepG2细胞 设立 阴性对照、 梯度浓度的利福平、 红霉素组 培养24h后 阴性对照的数据居然显著低于所有给药组 啥情况啊? 怎么会给药反而促进细胞生长了呢？ 另外之前看帖说最好吸光值在0.1-0.7之间 我测出来的所有值都在1.0-1.7之间啊 是细胞长得太密了么 还是什么原因？ 求各位大侠出手相助 小女子万分感激！！ 补充：药是用DMSO溶的 给药组和对照组都含0.1%的DMSO 另外我是把配好的5mg/ml的MTT先加到培养基中稀释十倍，然后再给到每个孔的 这样和每孔先各给20ul 5mg/ml的MTT 再补180ul的培养基 有区别么？ [ Last edited by fridayalicia on 2012-5-21 at 10:57 ] |
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5楼2012-05-22 17:05:37
silicare
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2楼2012-05-21 11:15:15
fridayalicia
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3楼2012-05-21 12:04:40
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【答案】应助回帖
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zhaohq1209: 金币+1, 鼓励一下撒 2012-05-22 22:30:36
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zhaohq1209: 金币+1, 鼓励一下撒 2012-05-22 22:30:36
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阴性对照就是只加培养基不加药的是吧？这个就太奇怪了 首先不是DMSO的问题，0.5%的DMSO我都做过，没有什么毒性 10000cell/mL也应该没有问题，那我只能考虑是不是种板的时候你空白的那一行种稀了，实在是想不出更好的解释 MTT不建议你那么加，倒不是说哪里有问题，我是没见过这么混着加的，你还是直接加吧 至于吸光度的问题，一般加药孔不应该过1，你要是觉得大了就早点加药，不要等细胞长得太满 总之，给你的意见就是，接着做呗，什么实验都不会一次成功的，尤其是细胞实验。祝LZ好运 |
4楼2012-05-22 09:32:43
