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紫外用光栅光谱仪对蛋白质纯品的检测
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学校里条件有限,只能用wds-8a的光栅光谱仪对蛋白质纯品进行检测。我用0.9%的nacl配制牛血清蛋白溶液(50微克、100微克、200微克/ml等8组),准备用透射光强来计算吸光度值,从而得到回归方程。可是在检测中,发现蛋白质在220nm附近有最低的透射比(用0.9%nacl做基线),而在280nm附近的透射虽然也不是完全100%的,但是比220nm处的大了不少。我本来准备用280nm处的峰值做计算的,可是值那么低,做出来的结果会不会很不准了?215nm处的峰值时肽键的吸收,当然也有215-225差值的计算方法,可是这种方法不是只有在蛋白质浓度较低的情况下才适合么? 不知道是我的样品有问题,还是仪器的问题,这几天毕业设计快结束了,比较着急啊,求解答啊,多谢大家了!! |
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