应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，求助，分子基础知识
51/1返回列表
查看: 1821  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 求助，求助，分子基础知识

问一些比较低级的问题，部分是胡思乱想的。
情况：外源基因导入感受态细胞，最简单常规的转化方法，不用基因枪啥的直接打进去。
1）外源基因和载体链接，转化Ecoli。为什么非要链接载体？线性的DNA就不能进去了？即使链接到载体上，suoper coiled DNA vector也不是要解链变成线性单链DNA后才进入细胞，另一条留在胞外不是？何苦跟载体连接成那么大的链才进去？

2）以下四种DNA哪个更容易进入细胞？双链环状，单链环状，双链线性，单链线性. 转化前，ligation之后的DNA 不知道能不能按以上状态存在，就当是假设也行。

3）双链环状超螺旋DNA进入细胞之前据说要解链变成单链线性（网上查的,不知对错），那究竟在什么位点切割成线性？所有质粒都在同一位点么？

4）有没有以下可能：外源基因和载体没有连上，但而这都被转进细胞了？或者只有其中一个转进细胞了？还表达了如抗性基，lacZ基因等情况？

5）有没有另一种可能：外源基因与载体一端连接成功，另一端未连上，但却转入细胞了，还表达了各种筛选基因，因而假装阳性克隆滥竽充数的？

6）线性质粒就不能在细胞中正常存在，复制，转录，遗传吗？非要呈环状吗？


多谢各位哈~~~尽量给个完整的答案吧，回答部分问题也行，但是我确实想整明白。

50分期，有答必有币~~~追赏！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
向钱看，向厚赚
1楼 2012-05-17 02:33:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gaowei706 at 2012-05-17 08:26:16:
楼主应该好好看看分子生物学或分子遗传学教材，书里内容都可以解答你的这些问题。你有这些问题是因为你没搞清楚载体和Ecoli的特点

谢谢关注，回你贴时为啥不能加分了呢？
赞一下 回复此楼
向钱看，向厚赚
8楼2012-05-17 13:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)
沙发是我的
回复此楼
向钱看，向厚赚
2楼2012-05-17 02:34:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
懒蛋: 金币+10, ★有帮助, 谢谢~关注的都给分，尽管你的回答跟没答似的 2012-05-17 13:49:39
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-17 14:43:14
楼主问题都挺有意思的，
外源基因和载体链接，转化Ecoli，如果不连接，外源基因片段很容易被Ecoli体内的酶消化掉的。
其它问题我也等答案哦
赞一下 回复此楼
转向地质微生物学
3楼2012-05-17 08:05:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaowei706

铁杆木虫 (职业作家)

资深潜水者
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 应助指数-1 2012-05-17 08:29:39
楼主应该好好看看分子生物学或分子遗传学教材，书里内容都可以解答你的这些问题。你有这些问题是因为你没搞清楚载体和Ecoli的特点
赞一下 回复此楼
逐渐失去棱角
4楼2012-05-17 08:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 86/4300 2026-08-18 00:18 by longsantaizi
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭