| 查看: 1553 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
懒蛋铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助，求助，分子基础知识
|
|
|
问一些比较低级的问题，部分是胡思乱想的。 情况：外源基因导入感受态细胞，最简单常规的转化方法，不用基因枪啥的直接打进去。 1）外源基因和载体链接，转化Ecoli。为什么非要链接载体？线性的DNA就不能进去了？即使链接到载体上，suoper coiled DNA vector也不是要解链变成线性单链DNA后才进入细胞，另一条留在胞外不是？何苦跟载体连接成那么大的链才进去？ 2）以下四种DNA哪个更容易进入细胞？双链环状，单链环状，双链线性，单链线性. 转化前，ligation之后的DNA 不知道能不能按以上状态存在，就当是假设也行。 3）双链环状超螺旋DNA进入细胞之前据说要解链变成单链线性（网上查的,不知对错），那究竟在什么位点切割成线性？所有质粒都在同一位点么？ 4）有没有以下可能：外源基因和载体没有连上，但而这都被转进细胞了？或者只有其中一个转进细胞了？还表达了如抗性基，lacZ基因等情况？ 5）有没有另一种可能：外源基因与载体一端连接成功，另一端未连上，但却转入细胞了，还表达了各种筛选基因，因而假装阳性克隆滥竽充数的？ 6）线性质粒就不能在细胞中正常存在，复制，转录，遗传吗？非要呈环状吗？ 多谢各位哈~~~尽量给个完整的答案吧，回答部分问题也行，但是我确实想整明白。 50分期，有答必有币~~~追赏！  |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助有机题目，关于格式试剂的，希望大牛来指导一下。。
已经有9人回复
- 【求助/交流】求助分子生物学基础知识
已经有3人回复
- 【求助】热塑性和热固性
已经有7人回复
- 【求助】求2010年注册化工工程师基础考试的考试大纲
已经有4人回复
- 【求助】介绍高分子溶液性能方面的比较好的书籍都有哪些？
已经有5人回复
- 【求助】一名大三学生的问题
已经有82人回复
liujianmin68
木虫 (职业作家)
努力发展交叉学科
- MolEPI: 1
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 10313.6
- 红花: 3
- 帖子: 4281
- 在线: 191.7小时
- 虫号: 1186130
- 注册: 2011-01-08
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
3楼2012-05-17 08:05:45
懒蛋
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 7107.7
- 散金: 318
- 红花: 9
- 沙发: 1
- 帖子: 1809
- 在线: 356.5小时
- 虫号: 1231871
- 注册: 2011-03-13
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2012-05-17 02:34:02
4楼2012-05-17 08:26:16
hyacinth326
金虫 (正式写手)
- 应助: 74 (初中生)
- 金币: 2003.3
- 散金: 304
- 红花: 4
- 帖子: 394
- 在线: 1338.8小时
- 虫号: 1502977
- 注册: 2011-11-21
- 性别: MM
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2012-05-17 10:31:20
