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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

[求助] C18柱柱压高,高水相和高有机相冲洗,压力均不降

新买的迪马C18柱测定生物样本,使用不到一个月,岛津的色谱仪,有预柱;
有一次使用磷酸二氢钾的缓冲液(PH3.0):乙腈(15:85)作为流动相,流速从0.2ml/min直接升到了1,压力突然升高,立即停泵,用乙腈-水(10:90)冲洗,当时压力已经降下来了,继续用乙腈-水以0.2的流速过夜以后,第二天早上来,压力又升高了,
已经试过用90%水-乙腈,90%水-甲醇,纯乙腈,纯甲醇冲洗,柱压都没降下来;
发现用0.2%的醋酸水溶液做水相的时候,压力下降2-3MPa,但换成水以后,又会有上升趋势,
到底是缓冲盐析出了,还是别的东西堵了啊,为什么我冲了这么久,柱压还是不降啊;各位大侠救命啊~~~
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痴夷子皮

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-15 22:45:45
duyumeng1989: 金币+2 2012-05-22 09:07:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by duyumeng1989 at 2012-05-15 21:33:17:
预柱换了新柱芯,柱套也超声过了,现在预柱压力大约3MPa,

1。是否排除流动相组分及流速变化,引起管路中流动相粘度变化,进而引起压力变化。
2。确定到底是管路有盐析出抑或是色谱柱有污染致使压力偏高。(卸下色谱柱后检查压力判断)
3。若非色谱柱原因,检查管路配件是否有析出或污染,如单向阀,密封圈。
4。色谱柱原因,用75%乙腈25%水清洗1h,改用异丙醇1h试试看。
守候在风中的宁静。
4楼2012-05-15 21:40:31
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普通回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2012-05-15 21:38:08
既然有预柱,直接卸下预柱,取柱芯,异丙醇超声清洗或更换即可。
守候在风中的宁静。
2楼2012-05-15 21:27:07
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 21:27:07:
既然有预柱,直接卸下预柱,取柱芯,异丙醇超声清洗或更换即可。

预柱换了新柱芯,柱套也超声过了,现在预柱压力大约3MPa,
3楼2012-05-15 21:33:17
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 21:40:31:
1。是否排除流动相组分及流速变化,引起管路中流动相粘度变化,进而引起压力变化。
2。确定到底是管路有盐析出抑或是色谱柱有污染致使压力偏高。(卸下色谱柱后检查压力判断)
3。若非色谱柱原因,检查管路配件 ...

非常感谢您的帮助,应该是色谱柱的问题,因为我不接柱子,压力只有0.5MPa,只接柱子不接检测器,压力也不会下降,明天用异丙醇冲试试,另外,我疑惑的是,醋酸和水做水相,压力会有2-3MPa的差别吗?还是说可能是我的柱子里有什么杂质是需要酸才能冲出来的?
5楼2012-05-15 21:53:57
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 21:40:31:
1。是否排除流动相组分及流速变化,引起管路中流动相粘度变化,进而引起压力变化。
2。确定到底是管路有盐析出抑或是色谱柱有污染致使压力偏高。(卸下色谱柱后检查压力判断)
3。若非色谱柱原因,检查管路配件 ...

亲~~~异丙醇冲洗无效啊亲~~我的柱子不会是报废了吧~~~
6楼2012-05-16 14:43:43
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dingjinglvde

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是色谱柱的滤网脏了
需要清洗,或采用不同极性流动相长时间冲洗
7楼2012-05-16 15:02:00
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dingjinglvde at 2012-05-16 15:02:00:
可能是色谱柱的滤网脏了
需要清洗,或采用不同极性流动相长时间冲洗

我昨晚用10、30、50、70、90、100%的乙腈各冲了80min,压力未降
8楼2012-05-16 15:09:35
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dingjinglvde

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by duyumeng1989 at 2012-05-16 15:09:35:
我昨晚用10、30、50、70、90、100%的乙腈各冲了80min,压力未降

参见http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20071105/1045750/
http://bbs.antpedia.com/viewthread.php?tid=20865
和《实用高效液相色谱法的建立》
9楼2012-05-16 16:52:38
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好像有一个洗柱子的方法的,但我具体不记得了,大致是各种极性的溶剂,按次序依次冲洗,你可以网上再查查。
10楼2012-05-17 11:43:44
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