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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 维持培养基pH8.0，需要加入什么物质？
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cauobama

新虫 (著名写手)

[求助] 维持培养基pH8.0，需要加入什么物质？

我要配制培养基，基本成分为sucrose 10.0g, (NH4)2SO4 1.0g, CaCO3 1.0g, MgSO4 0.5122g, KCl 0.1g, Na2HPO4•12H2O 2.507g, ddH2O 1.0L, 我想让培养基从开始养菌到最后（大约7天）pH值维持在8.0左右，培养基需要加入什么缓冲液呢？ 加入的这个缓冲液会不会影响菌体的生长？
有的人说加入氢氧化钠或者盐酸，但是灭菌前可以调到8.0，培养一段时间会不会改变啊？
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1楼2012-05-11 20:43:48
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zcqh27

木虫 (正式写手)
cauobama: 回帖置顶 2012-05-15 11:55:43
引用回帖:
21楼: Originally posted by cauobama at 2012-05-14 10:54:17:
请问碱式碳酸镁是什么东西？还有不少碱式的吗？这个能作为换成物质？

(MgCO3)4·Mg(OH)2·5H2O
碱式碳酸镁可以与培养基一起灭菌，具有较强的pH缓冲能力。灭完菌后pH约为9以上，可以通二氧化碳，调节pH至6-7
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22楼2012-05-14 16:56:44
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wgy2007

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, 谢谢热心回复~ 2012-05-13 12:40:20
加尿素应该没有问题，我以前做过赖氨酸摇瓶加0.2-1％的尿素发酵72小时，放瓶时测得的pH在6-7之间，加2％的碳酸钙放瓶时测得pH在4-5之间，如果尿素影响比较大，可以考虑将碳酸钙的量加大，每瓶加0.5-1g，可以使pH下降的缓慢一些。碳酸氢钠在培养基中灭菌分解的更快，一般都是过滤除菌加入的，操作比较麻烦。
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6楼2012-05-12 10:30:34
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cauobama: 金币+2 2012-05-12 10:09:31
如果你培养的是细菌的话可以加点尿素试试，尿素被细菌分解利用产生的铵离子可以使pH上升，但是要控制在8.0左右可能难度大一些，自己实验摸索一下。摇瓶培养想要控制恒定的pH确实很难，如果有实验罐是可以实现的。
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cauobama
2楼2012-05-12 09:18:18
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yxx220

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cauobama: 金币+2 2012-05-12 10:09:38
我觉得还是加碳酸氢钠吧，尿素就不建议用了，因为尿素在灭菌时会因高温分解
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cauobama
3楼2012-05-12 09:48:10
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cauobama

新虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-05-12 09:18:18:
如果你培养的是细菌的话可以加点尿素试试，尿素被细菌分解利用产生的铵离子可以使pH上升，但是要控制在8.0左右可能难度大一些，自己实验摸索一下。摇瓶培养想要控制恒定的pH确实很难，如果有实验罐是可以实现的。

是的 我知道试验罐能够实现 可是我要养50瓶的菌 所以用试验罐不太现实 谢谢你的回复
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4楼2012-05-12 10:08:04
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cauobama

新虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by yxx220 at 2012-05-12 09:48:10:
我觉得还是加碳酸氢钠吧，尿素就不建议用了，因为尿素在灭菌时会因高温分解

碳酸氢钠不是缓冲溶液吧？ 培养一段时间估计就不行了吧？ 我的是最好控制在8.0左右
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5楼2012-05-12 10:09:21
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
磷酸缓冲液应该就可以吧
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人的差别在于业余时间
7楼2012-05-12 10:40:57
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cauobama

新虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-05-12 10:30:34:
加尿素应该没有问题，我以前做过赖氨酸摇瓶加0.2-1％的尿素发酵72小时，放瓶时测得的pH在6-7之间，加2％的碳酸钙放瓶时测得pH在4-5之间，如果尿素影响比较大，可以考虑将碳酸钙的量加大，每瓶加0.5-1g，可以使pH下 ...

谢谢你的回复 加碳酸钙是不可以的 因为我的实验就是测定钙离子对细菌的影响 至于加尿素应该不能维持一个不变的pH条件吧 我再想一下 谢谢
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8楼2012-05-12 12:09:04
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cauobama

新虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-05-12 10:40:57:
磷酸缓冲液应该就可以吧

这个换成能力比较差 应该是不可以的 因为我里面本来就有磷酸氢二钠的 但是培养3天后pH就到了5.3了
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9楼2012-05-12 12:10:19
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wtaotaoj

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+5, 高手哦~ 2012-05-13 12:40:55
scelab: , 头像很给力 2012-05-13 12:41:09
cauobama: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-05-14 10:48:18
本帖内容被屏蔽
10楼2012-05-12 15:13:52
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