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香蕉宝宝

木虫 (小有名气)

[求助] 大家帮个忙,看看这培养基适不适合用

这个是用来筛选尿嘧啶营养缺陷型的毕赤酵母的培养基,但是做了有三个多月了,一直没有筛到
选择培养基:葡萄糖2%,YNB 0.34%,Uracil 5mg/l,FOA 1mg/ml
基本培养基:葡萄糖2%,YNB 0.34%
大家看看还缺少什么,提点意见吧
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springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


香蕉宝宝(金币+1): 2011-05-13 18:14:04
wolfebst(金币+1): 鼓励交流 2011-05-13 23:17:01
用SC培养基试试吧,我们实验室有师兄用过
2楼2011-05-13 13:27:28
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-14 21:11:51
rainwander(EPI+1): 2011-05-14 21:12:00
我没有筛选过这个,说得不对也不要介意。
你的选择培养基里有氮源葡萄糖,生长因子尿嘧啶,选择因子FOA,照理说应该没问题,我看到YNB是无氨基酵母氮源(Yeast Nitrogen Base without Amino Acids 是在这个网页 http://www.qcbio.com/ynb.htm )也可以啊,如果能在这个培养基上生长的酵母应该就是缺陷型的,是长不出来还是什么都能长?

另外SC培养基我在这个网页上看到 http://www.hopebiol.com/standard/medium_1777.htm
营养很齐全,应该是什么微生物都能长,用来筛选尿嘧啶缺陷型我觉得不行。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-05-14 17:04:24
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香蕉宝宝

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-14 17:04:24:
我没有筛选过这个,说得不对也不要介意。
你的选择培养基里有氮源葡萄糖,生长因子尿嘧啶,选择因子FOA,照理说应该没问题,我看到YNB是无氨基酵母氮源(Yeast Nitrogen Base without Amino Acids 是在这个网页  ...

谢谢您的回帖,现在在选择培养基上生长了,按道理在基本培养基上是不能生长的,但是在基本培养基上也生长了,我就纳闷,不知道怎么进一步进行筛选了。在筛选尿嘧啶营养缺陷型时,在含有FOA的培养基上明显生长了,但是在不含FOA的培养基上也生长了,这是咋回事?野生型的菌在能够将FOA催化形成有毒物质而不能生长,而尿嘧啶营养缺陷型缺失了使FOA形成有毒物质的酶,因此,在含有FOA的培养基上能够生长,但是营养缺陷型的话在不含有尿嘧啶和FOA的基本培养基上是也是不能生长的呀,但是却也生长了,这是怎么回事,您希望您给点意见,再次谢过!!!!!!
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4楼2011-05-18 09:13:49
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

我没有什么想法,不知道是不是琼脂里有杂质。
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5楼2011-05-18 18:15:00
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王子扶苏

金虫 (小有名气)

配培养基时是否调过PH值啊?我也在做这个,跟你描述的情况一样。。。
6楼2012-03-12 13:37:18
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zhlsmile

铁虫 (小有名气)

这个培养基需要是minus URA的,所以YNB要用w/o的AA和AS的 再加CSM-ura,加AS,也就是可以用SC-ura的培养基,加FOA,Uracil
7楼2013-04-22 19:15:02
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