10楼: Originally posted by youngsun50 at 2012-06-24 12:40:53
你好，谢谢你上次的帮助，这次又做了一遍，还是不理想，希望你有空再指点一下：
1）我的page胶重新换了所用的母液，并且确定tris ph正确，试制了一次10%的还是容易破，试制了次12.5%(4h凝固后，没有上胶条电泳，直 ...

11楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-06-25 21:03:51
1：胶的问题我也不清楚是怎么回事，我制的时候是凝过夜的，用水饱和正丁醇封，覆盖保鲜膜，约1～2h后补加一些去离子水在上面。很少见胶脆。胶中部心电图样的纹说明凝的不好。要不选用更好的试剂？我用的是Sigma的产 ...

12楼: Originally posted by youngsun50 at 2012-06-25 21:46:52
谢谢！
1）封胶时，水饱和正丁醇的量不严格吧，我一块胶封了2-3ml,而且倒胶凹槽处也加了2ml，这个有影响吗？我胶面中间突出了。 那个胶中间心电图应该是气泡引起的，制胶时中间出现了三个气泡。
2）我那个程序是 ...

13楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-06-26 15:36:46
水饱和正丁醇的量不严格，覆盖了就行了。
低熔点琼脂糖凝的较慢，但没见过很水的样子，玻璃板倾斜的时候是不会流动的。
我常用的程序是：
30v 7h，60v 7h（这两步水化），200v、500v、1000v各1h，Grad 10000v， ...

2楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-05-22 10:34:52
TCA丙酮沉淀丢蛋白比较厉害，除盐效果应该还行。楼主这个上样量，我在跑的时候要聚焦10万vhrs。
超滤除盐没做过。
楼主的裂解液含盐很多吗？为什么用TCA丙酮沉淀了？没做过G-细菌，不很了解。
胶条的选择，初次跑 ...

15楼: Originally posted by 康熙61 at 2014-06-13 11:40:15
你双向电泳做的怎么样？可以告诉我 你提取蛋白的方法吗？我做组织和细胞。组织有肝组织 肾组织之类的 谢谢...