13楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-06-26 15:36:46
水饱和正丁醇的量不严格，覆盖了就行了。
低熔点琼脂糖凝的较慢，但没见过很水的样子，玻璃板倾斜的时候是不会流动的。
我常用的程序是：
30v 7h，60v 7h（这两步水化），200v、500v、1000v各1h，Grad 10000v， ...

2楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-05-22 10:34:52:
TCA丙酮沉淀丢蛋白比较厉害，除盐效果应该还行。楼主这个上样量，我在跑的时候要聚焦10万vhrs。
超滤除盐没做过。
楼主的裂解液含盐很多吗？为什么用TCA丙酮沉淀了？没做过G-细菌，不很了解。
胶条的选择，初次跑

3楼: Originally posted by youngsun50 at 2012-05-22 12:50:50:
谢谢！
10万vhrs?那你的电压是8kv吗，我用的GE系统，说用strip holder是最大电压8k。我的裂解液为尿素7M，硫脲2M，CHAPS4%，DTT65mM,未加IPG buffer; 水化液为尿素7M，硫脲2M，CHAPS4%DTT18.2mM,IPGbuffer 约1.3%