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笑笑-

铁虫 (初入文坛)

[求助] 测蛋白等电点的方法

查看了下测蛋白等电点的方法,都说等电聚焦电泳,而实验室只有普通电泳的那种垂直电泳槽,没有等电聚焦电泳的水平电泳槽,也供不了那么大的电压。要跑聚焦电泳的话代价太大,所以想请教一下,只通过普通的电泳,怎么样有得到蛋白等电点。我的样是包含多种蛋白,较杂的。
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加油
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, MolEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-10 20:26:03
理论上来说...可以用滴定的方法来做。理论基础是:蛋白质在pH为等电点时溶解度最小,所以当饱和或接近饱和的蛋白质溶液在滴定到等电点时会发生沉淀,此时测定溶液的pH值,就可以得到等电点的值了。

不过这只是理论啊...实际上,LZ你这种情况,只有用IEF来做才能测到各个蛋白的等电点。而且...做了IEF还不算完,你还得知道每一个条带是哪个蛋白,不然怎么把一种蛋白质和它的等电点对应起来呢?

另外,如果知道有哪几种蛋白质,网上可以查等电点的...也有利用氨基酸序列和二级结构预测等电点的,LZ可以自己查查看。
3楼2012-05-10 17:13:43
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电泳测定蛋白质的等电点只有等电聚焦电泳,普通的电泳没法测定蛋白质的等电点。
2楼2012-05-10 15:30:41
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