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笑笑-

铁虫 (初入文坛)

[求助] 测蛋白等电点的方法

查看了下测蛋白等电点的方法，都说等电聚焦电泳，而实验室只有普通电泳的那种垂直电泳槽，没有等电聚焦电泳的水平电泳槽，也供不了那么大的电压。要跑聚焦电泳的话代价太大，所以想请教一下，只通过普通的电泳，怎么样有得到蛋白等电点。我的样是包含多种蛋白，较杂的。
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加油
1楼 2012-05-10 14:40:20
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回帖置顶 ( 共有1个 )

holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, MolEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-10 20:26:03
理论上来说...可以用滴定的方法来做。理论基础是：蛋白质在pH为等电点时溶解度最小，所以当饱和或接近饱和的蛋白质溶液在滴定到等电点时会发生沉淀，此时测定溶液的pH值，就可以得到等电点的值了。

不过这只是理论啊...实际上，LZ你这种情况，只有用IEF来做才能测到各个蛋白的等电点。而且...做了IEF还不算完，你还得知道每一个条带是哪个蛋白，不然怎么把一种蛋白质和它的等电点对应起来呢？

另外，如果知道有哪几种蛋白质，网上可以查等电点的...也有利用氨基酸序列和二级结构预测等电点的，LZ可以自己查查看。
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3楼2012-05-10 17:13:43
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普通回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电泳测定蛋白质的等电点只有等电聚焦电泳，普通的电泳没法测定蛋白质的等电点。
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2楼2012-05-10 15:30:41
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