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Johnsonzheng

木虫 (小有名气)

[求助] 有无溴化乙锭(EB)替代品来做样品与DNA结合的指示剂

本人化学专业,对生物方面了解较少,但最近在老板让我们测试我们制备出来的配合物和DNA结合情况。用的是最普通的方法,在溴化乙锭(EB)和DNA的混合溶液中,溴化乙锭因为会插入DNA的碱基对中而发出强荧光,逐步加入我们的配合物溶液,若我们的配合物能够和DNA有插入作用的话,则可以取代溴化乙锭插入DNA碱基中,使得溴化乙锭的荧光减弱。但是溴化乙锭是强致癌物,很毒。我们这里的防护措施有很不好,所以不想用溴化乙锭,网上一查有很多溴化乙锭的替代品,都好贵,但是那些好像都是用来最DNA染料的,去做更高级的DNA结合实验的,不知可否用在我们这个简单的实验中?
另外现在我知道的溴化乙锭替代品有EZ-Vision(含三条指示带1ml 385rmb 价格还可以接受)Gold View或者Green View。不知这些替代品可否用在我刚才说的那个实验上呢?
谢谢各位的指导帮助啊。
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phuanhuan

银虫 (小有名气)

lz应该还要考虑荧光分子插入后容不容易被取代吧,我们实验室原来用的是EB,后来强烈要求换成了gelred了,效果还不错。
18楼2013-02-22 11:30:17
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vir2008

木虫 (著名写手)

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★ ★
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Johnsonzheng: 金币+2, 有帮助 2012-05-11 09:39:33
你做的领域我不了解。不过在电泳的时候,EB的效果最好。GOLD VIEW我们实验室用过,条带较弱,而且短片段效果差。
其实,EB这东西只要手上没有伤口,一般没事;再就是不要往沸腾的液体中加,防止挥发。其他没太多危险。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2012-05-09 20:59:56
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XOooZzz

银虫 (小有名气)

有,记得有几个花青类染料效果不错,具体名字不记得了,只记得有gel red和sybr green系列,但sybr green是比较不稳定的。按理能把dna染色的东东都有致癌性,花青类因为分子量较大而不能直接进入人体,所以比较安全。

市面上听说有用剧毒的吖啶橙冒充安全染料的,lz选择时要注意。

以上基本上都是听说,我也没用过这些贵东西。
3楼2012-05-10 00:18:17
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baihua1990

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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Johnsonzheng: 金币+2 2012-05-11 09:39:47
有,我们实验室有一个替代品,不过名字我忘了,因为师兄师姐不让用,说毒性和EB差不多,毕竟都是和DNA结合嘛,还不如用EB呢。。。
4楼2012-05-10 15:11:33
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xmuring

木虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

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SYBR Green I的效果很好,灵敏度特别高,而且价格也不贵,你可以尝试下
5楼2012-05-10 17:13:21
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xiangshengyan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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Johnsonzheng: 金币+1, 有帮助 2012-05-11 09:40:06
还是用EB 吧
注意操作就是了
ANNA&KEVIN
6楼2012-05-11 03:13:55
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wlei179488

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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gel red效果很好,个人感觉跟EB差不多
7楼2012-05-11 08:15:11
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bigtreeman

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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还是用EB吧,毕竟做实验还是要结果的。
8楼2012-05-11 08:50:06
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ligy6

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还是用EB效果好,注意要戴手套,等到琼脂糖凝胶温度降到60~70℃时再加入,防止挥发就可以了。
9楼2012-05-11 09:27:07
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Johnsonzheng

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xmuring at 2012-05-10 17:13:21:
SYBR Green I的效果很好,灵敏度特别高,而且价格也不贵,你可以尝试下

SYBR Green I可以用在我说的荧光检测领域么?
10楼2012-05-11 09:33:21
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