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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 考马斯亮蓝测蛋白含量，蒸馏水吸光值比样品高
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llower

银虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝测蛋白含量，蒸馏水吸光值比样品高

我用考马斯亮蓝法测 小鼠肝组织中蛋白含量 按试剂盒的要求操作的 使用酶标仪测定 为什么蒸馏水加考马斯亮蓝的 吸光值会比 肝组织液加考马斯亮蓝 还大呢 反复做了三次 结果都是如此
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~
1楼 2012-05-08 21:23:34
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eaten

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-09 10:48:06
因为不知道你具体的操作，所以只能推断一下可能的结果。
首先你时候按照正确的操作步骤进行的。
你出现这样的结果，我想问下你之前有没有做标线。加考马斯亮蓝后的蛋白测得的OD值是否在标线的范围内。个人经验觉得这方面可能是原因。
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2楼2012-05-09 09:44:23
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雪国的蔷薇

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-09 10:48:00
可能的原因：
1. 你的仪器检测波长设置是否无误
2. 是否对仪器做了检修
3. 是否进行了空白样矫正
4. 你的OD值是否超出标曲范围
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3楼2012-05-09 10:18:53
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xianglong555

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-05-11 08:58:06
您是否进行了重复操作，如果重复三次，结果还是这样，说明您的方案有问题。
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做人就要做个好人@！
4楼2012-05-09 10:42:44
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ningda47

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xianglong555 at 2012-05-09 10:42:44:
您是否进行了重复操作，如果重复三次，结果还是这样，说明您的方案有问题。

考马斯亮蓝配出来是墨绿色怎么回事啊
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路是自己选的，就是爬着也得到终点，坚持、加油！
5楼2012-05-09 12:02:09
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llower

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xianglong555 at 2012-05-09 10:42:44:
您是否进行了重复操作，如果重复三次，结果还是这样，说明您的方案有问题。

完全都是按照试剂盒的说明操作的啊，而且重复了 三次 都是这个结果
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~
6楼2012-05-09 16:34:45
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llower

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 雪国的蔷薇 at 2012-05-09 10:18:53:
可能的原因：
1. 你的仪器检测波长设置是否无误
2. 是否对仪器做了检修
3. 是否进行了空白样矫正
4. 你的OD值是否超出标曲范围

用蒸馏水校正的 没有做标曲 只是按照试剂盒的要求做了 标准样的od值 使用酶标仪测定的，
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7楼2012-05-09 16:37:16
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llower

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by eaten at 2012-05-09 09:44:23:
因为不知道你具体的操作，所以只能推断一下可能的结果。
首先你时候按照正确的操作步骤进行的。
你出现这样的结果，我想问下你之前有没有做标线。加考马斯亮蓝后的蛋白测得的OD值是否在标线的范围内。个人经验觉 ...

没有做标线，只是按照试剂盒的要求 做了一个标准浓度的 测定，所有操作都是按照试剂盒的步骤操作的
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8楼2012-05-09 16:38:42
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eaten

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
leecius: 金币+1, 谢谢！ 2012-05-11 08:58:16
标线是必须做的，蛋白测得的OD值必须落在标线范围内，不然测得的值不准确，也没有意义，你先做个标线看看。
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9楼2012-05-09 16:55:14
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llower

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by eaten at 2012-05-09 16:55:14:
标线是必须做的，蛋白测得的OD值必须落在标线范围内，不然测得的值不准确，也没有意义，你先做个标线看看。

没有蛋白的标品，买的试剂盒，里面只有一个标品，浓度是已知的
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10楼2012-05-10 10:29:30
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