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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 考马斯亮蓝测蛋白含量，蒸馏水吸光值比样品高
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ningda47

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xianglong555 at 2012-05-09 10:42:44:
您是否进行了重复操作，如果重复三次，结果还是这样，说明您的方案有问题。

请问牛血清白蛋白用啥配的啊
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路是自己选的，就是爬着也得到终点，坚持、加油！
11楼2012-05-10 10:44:40
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eaten

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by ningda47 at 2012-05-10 10:44:40:
请问牛血清白蛋白用啥配的啊

你配置组织匀浆的时候用什么，配置血清白蛋白就用什么。一般用PBS。
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12楼2012-05-11 08:54:54
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ningda47

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by eaten at 2012-05-11 08:54:54:
你配置组织匀浆的时候用什么，配置血清白蛋白就用什么。一般用PBS。

我是测植物多糖的，
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路是自己选的，就是爬着也得到终点，坚持、加油！
13楼2012-05-11 10:37:25
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

我个人感觉是你肝组织样品的提取可能有问题，你拿到的来源于肝脏蛋白样品中，可能有一些酶类或者其他东西，影响了考马斯亮蓝的测定。要不先去查查文献看，考马斯亮蓝的适用范围？
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14楼2012-05-15 15:45:32
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llower

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by belladonae at 2012-05-15 15:45:32:
我个人感觉是你肝组织样品的提取可能有问题，你拿到的来源于肝脏蛋白样品中，可能有一些酶类或者其他东西，影响了考马斯亮蓝的测定。要不先去查查文献看，考马斯亮蓝的适用范围？

好的 谢谢你
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~
15楼2012-05-16 21:26:56
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jiangwm

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

考马斯亮蓝是不是有问题？配出来应该是棕色的。注意避光，现配先用
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16楼2012-05-17 00:45:10
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wyswu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ningda47 at 2012-05-09 12:02:09
考马斯亮蓝配出来是墨绿色怎么回事啊...

不同PH值条件下的考马斯亮蓝颜色是有差别的，低的时候（大概低于0.75）可以呈浅棕色，再高点就是墨绿色，至亮蓝色.可以试一下看
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17楼2013-11-17 19:56:27
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wyswu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般完全呈棕色的时候测的值不是很准确，可以通过扫描光谱看出来，就是那个吸收峰的偏移情况不对，有一篇较早的文章做了这个相关的。按照标准的操作来做应该是没问题的，考马斯亮蓝G250（是多少量忘记了）溶于50ml无水乙醇后，再加入100ml85％的磷酸（这个时候看起来是棕色的），定容至1000ml（颜色会向蓝色方向转变一点，有点记不清是什么颜色）
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18楼2013-11-17 20:04:24
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