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rhguo

铜虫 (小有名气)


[交流] Tritonx_100和GSH会不会影响分光光度计的测量

我在做GST融合蛋白原核表达,第一步骤是用PBT对菌泥进行重悬,然后裂解取上清上柱子,再用PBT洗。
       第一个问题就来了,因为有曲通Tritonx-100的原因, 用分光光计测浓度时,PBT做blank蛋白浓度直接+++++;尝试用水做空白,PBT测出来的浓度是4.19mg/ml, 不知道各位如何解决这一问题;如果只是单纯的用5体积PBT来洗涤柱子,怎么能保证杂蛋白全部洗涤下去了??
        第二个问题,50mM GSH洗脱,也是无法测量浓度,GSh也会影响测量蛋白浓度?非要透析完之后才能测量吗?
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xy656691

金虫 (正式写手)



rhguo(金币+3): 谢谢参与
帮顶;没做过
6楼2012-12-16 17:05:49
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