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Tritonx_100和GSH会不会影响分光光度计的测量
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rhguo
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[交流]
Tritonx_100和GSH会不会影响分光光度计的测量
我在做GST融合蛋白原核表达,第一步骤是用PBT对菌泥进行重悬,然后裂解取上清上柱子,再用PBT洗。
第一个问题就来了,因为有曲通Tritonx-100的原因, 用分光光计测浓度时,PBT做blank蛋白浓度直接+++++
;尝试用水做空白,PBT测出来的浓度是4.19mg/ml
, 不知道各位如何解决这一问题;如果只是单纯的用5体积PBT来洗涤柱子,怎么能保证杂蛋白全部洗涤下去了??
第二个问题,50mM GSH洗脱,也是无法测量浓度,GSh也会影响测量蛋白浓度?非要透析完之后才能测量吗?
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