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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » Tritonx_100和GSH会不会影响分光光度计的测量
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rhguo

铜虫 (小有名气)

[交流] Tritonx_100和GSH会不会影响分光光度计的测量

我在做GST融合蛋白原核表达，第一步骤是用PBT对菌泥进行重悬，然后裂解取上清上柱子，再用PBT洗。
       第一个问题就来了，因为有曲通Tritonx-100的原因， 用分光光计测浓度时，PBT做blank蛋白浓度直接+++++；尝试用水做空白，PBT测出来的浓度是4.19mg/ml, 不知道各位如何解决这一问题；如果只是单纯的用5体积PBT来洗涤柱子，怎么能保证杂蛋白全部洗涤下去了？？
        第二个问题，50mM GSH洗脱，也是无法测量浓度，GSh也会影响测量蛋白浓度？非要透析完之后才能测量吗？
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1楼2012-05-05 23:04:36
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