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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳
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saliangqh

新虫 (正式写手)

[交流] DNA电泳

跑DNA电泳的亲们 交流一下DNA电泳吧 谢谢了


这是我跑的电泳
用CTAB法提取
将样品加20μl SDS和1ml预热的CTAB提取液，在65℃下水浴1h，其每间隔5min轻轻摇晃，加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇=25:24:1，在漩涡混合器上震荡混匀，10000r4℃离心10min，取上清加1ml冷冻的无水乙醇和50μl乙酸钠（3M PH=5）-20℃冷冻1h，10000r4℃离心10min，用70%无水乙醇洗涤2次，干燥后加TE溶解，-20℃保存备用。
0.8%琼脂糖电泳 染色10min 凝胶成像
出来的图像是这样的 想请大家帮分析一下 谢谢

[ Last edited by saliangqh on 2012-5-2 at 17:11 ]
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1楼 2012-05-01 21:07:56
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+3, Good！杀生丸同学很热心~ 2012-05-08 18:57:04
样品应该能用液氮研磨吧？研磨充分一点，然后缩短一点水浴时间（降解降解的的可能性），水浴20-30min。
加入酚氯仿后不要用涡旋仪，改用手轻柔颠倒20-30min混匀（对提取完整性好的gDNA有所帮助。）
在上清前加入RNase A，消化掉RNA，排除弥散是由于降解的RNA引起。

祝实验顺利。
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29楼2012-05-08 14:46:17
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muc_huanliu

金虫 (正式写手)
★
saliangqh(金币+1): 谢谢参与
呵呵，楼主想问什么呢？电泳这个词汇太单一了，建议说具体问题。
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2楼2012-05-01 22:37:51
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杜保群

金虫 (小有名气)
★
saliangqh(金币+1): 谢谢参与
是啊  太笼统了   还是具体一些好
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3楼2012-05-01 23:36:13
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308630949

银虫 (小有名气)
★
saliangqh(金币+1): 谢谢参与
你想交流什么？我觉得还好吧，没什么困难的...
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4楼2012-05-02 09:47:58
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zhixuec9楼
2012-05-02 16:56   回复  
saliangqh(金币+1): 谢谢参与[rate]saliangqh 2 16[/rate]
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