24小时热门版块排行榜    

查看: 2690  |  回复: 9

skuy1223

金虫 (小有名气)

[求助] M-MLV可以代替powerscript RTase做RACE第一链合成吗?

请做过RACE的高手指点,SMART RACE cDNA Amplification Kit中的powerscript RTase可以用M-MLV(Invitrogen)来代替吗?二者有什么区别呢?用后者做第一链合成的话对后续的克隆有什么影响吗?谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

努力!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, Good! 2012-04-29 09:49:59
skuy1223: 金币+1, 有帮助 2012-04-29 19:51:57
嗯.....................
       不知你用的什么Kit,RTase只有两种:M-MLV/AMV,其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物,统统还是来自以上的M-MLV和AMV,所以替代当然理论上可以,但是每个公司的商品Kit都会有自行的优化措施,诸如Buffer优化、反应优化,所以不到非常阶段,不要随便拿东西替换Kit里的成分。
       个人看法,若有说错请高手指点
Let God do with it as He wills
2楼2012-04-29 09:45:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2 2012-04-29 15:36:28
amisking: 金币+2, 辛苦,鼓励下。 2012-04-29 17:18:07
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-29 09:45:56:
嗯.....................
       不知你用的什么Kit,RTase只有两种:M-MLV/AMV,其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物,统统还是来自以上的M-MLV和AMV,所以替代当然理论上可以,但是每个公司的商 ...

atlanticwi同学说得没错呢,这个酶是M-MLV改造来的。
BD PowerScript™ Reverse Transcriptase is a point mutant of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) reverse transcriptase (RT). This RNase H- enzyme lacks RNase H- enzyme retains wild-type polymerase activity, so it can synthesize longer cDNA fragments than wild-type MMLV-RT.
3楼2012-04-29 09:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-29 09:56:22:
atlanticwi同学说得没错呢,这个酶是M-MLV改造来的。
BD PowerScript™ Reverse Transcriptase is a point mutant of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) reverse transcriptase (RT). This RNase H-  ...

那如果替换的话可不可以呢?谢谢!
努力!
4楼2012-04-29 19:49:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-29 09:45:56:
嗯.....................
       不知你用的什么Kit,RTase只有两种:M-MLV/AMV,其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物,统统还是来自以上的M-MLV和AMV,所以替代当然理论上可以,但是每个公司的商 ...

这个kit中应该是M-MLV改造来的,但是我就是想知道二者可不可以互换使用……
努力!
5楼2012-04-29 19:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓风残月cl

新虫 (正式写手)

学习了   呵呵   其实我只是一知半懂    不好回复
6楼2012-04-30 12:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

引用回帖:
5楼: Originally posted by skuy1223 at 2012-04-29 19:51:30:
这个kit中应该是M-MLV改造来的,但是我就是想知道二者可不可以互换使用……

嗯.....................
       我前边也说了 理论上可以互换 毕竟Invitogen的M-MLV(商品名应该是SuperScript吧)也是基因改造产物 但每一个公司的Kit肯定有自己的优化方案,就好像电脑一样,理论上东西都是一样的,但是你胡乱组装那也会有兼容的问题
       所以你可以互换,但不保证100%发挥原产品的效果
Let God do with it as He wills
7楼2012-04-30 13:00:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-30 13:00:08:
嗯.....................
       我前边也说了 理论上可以互换 毕竟Invitogen的M-MLV(商品名应该是SuperScript吧)也是基因改造产物 但每一个公司的Kit肯定有自己的优化方案,就好像电脑一样,理论上东西都是一 ...

8楼2012-05-10 19:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nmhsd

木虫 (正式写手)

powerscript RTase除RT活性外还具有末端转移酶的活性吧,一般其他RTase不具备这样的功能,所以才会卖的那么贵,其他Buffer没什么科技含量。如果要代替也要找clontech的reverse tanscript代替吧,用M-MLV没有道理。
9楼2012-06-26 14:44:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by nmhsd at 2012-06-26 14:44:27
powerscript RTase除RT活性外还具有末端转移酶的活性吧,一般其他RTase不具备这样的功能,所以才会卖的那么贵,其他Buffer没什么科技含量。如果要代替也要找clontech的reverse tanscript代替吧,用M-MLV没有道理。

谢谢!!
努力!
10楼2012-06-28 17:27:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 skuy1223 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统查不到 +9 董八千 2026-08-26 9/450 2026-08-26 12:30 by yanmofang
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 怎么查啊 +4 huang1991js 2026-08-26 4/200 2026-08-26 11:26 by panjy.cn
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +6 process2012 2026-08-23 8/400 2026-08-26 11:03 by zjlp
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 出来了 +8 trojank 2026-08-26 8/400 2026-08-26 09:00 by gxc
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +24 木水思豆 2026-08-25 27/1350 2026-08-26 08:26 by yanchen918
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 19/950 2026-08-25 17:57 by chick875
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见