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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » M-MLV可以代替powerscript RTase做RACE第一链合成吗？
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skuy1223

金虫 (小有名气)

[求助] M-MLV可以代替powerscript RTase做RACE第一链合成吗？

请做过RACE的高手指点，SMART RACE cDNA Amplification Kit中的powerscript RTase可以用M-MLV（Invitrogen）来代替吗？二者有什么区别呢？用后者做第一链合成的话对后续的克隆有什么影响吗？谢谢！
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努力！
1楼 2012-04-29 03:27:48
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-04-29 09:49:59
skuy1223: 金币+1, ★有帮助 2012-04-29 19:51:57
嗯.....................
       不知你用的什么Kit，RTase只有两种：M-MLV/AMV，其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物，统统还是来自以上的M-MLV和AMV，所以替代当然理论上可以，但是每个公司的商品Kit都会有自行的优化措施，诸如Buffer优化、反应优化，所以不到非常阶段，不要随便拿东西替换Kit里的成分。
       个人看法，若有说错请高手指点
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Let God do with it as He wills
2楼2012-04-29 09:45:56
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2 2012-04-29 15:36:28
amisking: 金币+2, 辛苦，鼓励下。 2012-04-29 17:18:07
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-29 09:45:56:
嗯.....................
       不知你用的什么Kit，RTase只有两种：M-MLV/AMV，其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物，统统还是来自以上的M-MLV和AMV，所以替代当然理论上可以，但是每个公司的商 ...

atlanticwi同学说得没错呢，这个酶是M-MLV改造来的。
BD PowerScript™ Reverse Transcriptase is a point mutant of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) reverse transcriptase (RT). This RNase H- enzyme lacks RNase H- enzyme retains wild-type polymerase activity, so it can synthesize longer cDNA fragments than wild-type MMLV-RT.
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3楼2012-04-29 09:56:22
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skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-29 09:56:22:
atlanticwi同学说得没错呢，这个酶是M-MLV改造来的。
BD PowerScript™ Reverse Transcriptase is a point mutant of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) reverse transcriptase (RT). This RNase H-  ...

那如果替换的话可不可以呢？谢谢！
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努力！
4楼2012-04-29 19:49:42
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skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-29 09:45:56:
嗯.....................
       不知你用的什么Kit，RTase只有两种：M-MLV/AMV，其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物，统统还是来自以上的M-MLV和AMV，所以替代当然理论上可以，但是每个公司的商 ...

这个kit中应该是M-MLV改造来的，但是我就是想知道二者可不可以互换使用……
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努力！
5楼2012-04-29 19:51:30
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)
学习了   呵呵   其实我只是一知半懂    不好回复
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6楼2012-04-30 12:01:45
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
5楼: Originally posted by skuy1223 at 2012-04-29 19:51:30:
这个kit中应该是M-MLV改造来的，但是我就是想知道二者可不可以互换使用……

嗯.....................
       我前边也说了 理论上可以互换 毕竟Invitogen的M-MLV（商品名应该是SuperScript吧）也是基因改造产物 但每一个公司的Kit肯定有自己的优化方案，就好像电脑一样，理论上东西都是一样的，但是你胡乱组装那也会有兼容的问题
       所以你可以互换，但不保证100%发挥原产品的效果
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Let God do with it as He wills
7楼2012-04-30 13:00:08
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skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-30 13:00:08:
嗯.....................
       我前边也说了 理论上可以互换 毕竟Invitogen的M-MLV（商品名应该是SuperScript吧）也是基因改造产物 但每一个公司的Kit肯定有自己的优化方案，就好像电脑一样，理论上东西都是一 ...

8楼2012-05-10 19:40:14
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nmhsd

木虫 (正式写手)
powerscript RTase除RT活性外还具有末端转移酶的活性吧，一般其他RTase不具备这样的功能，所以才会卖的那么贵，其他Buffer没什么科技含量。如果要代替也要找clontech的reverse tanscript代替吧，用M-MLV没有道理。
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9楼2012-06-26 14:44:27
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skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by nmhsd at 2012-06-26 14:44:27
powerscript RTase除RT活性外还具有末端转移酶的活性吧，一般其他RTase不具备这样的功能，所以才会卖的那么贵，其他Buffer没什么科技含量。如果要代替也要找clontech的reverse tanscript代替吧，用M-MLV没有道理。

谢谢！！
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努力！
10楼2012-06-28 17:27:17
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