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skuy1223金虫 (小有名气)
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M-MLV可以代替powerscript RTase做RACE第一链合成吗？
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| 请做过RACE的高手指点，SMART RACE cDNA Amplification Kit中的powerscript RTase可以用M-MLV（Invitrogen）来代替吗？二者有什么区别呢？用后者做第一链合成的话对后续的克隆有什么影响吗？谢谢！ |
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atlanticwi
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7楼2012-04-30 13:00:08
atlanticwi
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【答案】应助回帖
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skuy1223: 金币+1, ★有帮助 2012-04-29 19:51:57
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skuy1223: 金币+1, ★有帮助 2012-04-29 19:51:57
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嗯..................... 不知你用的什么Kit，RTase只有两种：M-MLV/AMV，其他的那些乱七八糟的名称只是些基因工程改造的产物，统统还是来自以上的M-MLV和AMV，所以替代当然理论上可以，但是每个公司的商品Kit都会有自行的优化措施，诸如Buffer优化、反应优化，所以不到非常阶段，不要随便拿东西替换Kit里的成分。 个人看法，若有说错请高手指点  |
2楼2012-04-29 09:45:56
西瓜
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atlanticwi同学说得没错呢，这个酶是M-MLV改造来的。 BD PowerScript™ Reverse Transcriptase is a point mutant of Moloney murine leukemia virus (MoMLV) reverse transcriptase (RT). This RNase H- enzyme lacks RNase H- enzyme retains wild-type polymerase activity, so it can synthesize longer cDNA fragments than wild-type MMLV-RT. |
3楼2012-04-29 09:56:22
skuy1223
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