24小时热门版块排行榜    

查看: 2902  |  回复: 14

beautybanana

木虫 (著名写手)

一般是引物设计没有问题,RNA模板质量尚可,反转录都是可以的
11楼2012-04-24 22:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-25 13:56:30
RNA质量没问题反转录都不会有问题的
1)按照你所说你前面不消化DNA的能扩出来,而消化过的反而扩不出来的情况可以认为你的引物是没有问题的;
2)不知道你1-9号孔是不是所有的模板都一样的浓度,如果不一样考虑一下模板弄度的问题,如果一样那应该是模板的问题,重新再做一次吧
12楼2012-04-25 13:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by syn1985 at 2012-04-25 13:19:58:
RNA质量没问题反转录都不会有问题的
1)按照你所说你前面不消化DNA的能扩出来,而消化过的反而扩不出来的情况可以认为你的引物是没有问题的;
2)不知道你1-9号孔是不是所有的模板都一样的浓度,如果不一样考虑一 ...

谢谢回复。。。
13楼2012-04-25 14:33:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-04-24 21:02:01:
我是做动物的,不知道植物的,但是,首先,你要确定你的RNA反转的好不好,先做个内参,跑个25-30CYCLE
要是觉得提的RNA不好,可以跑个电泳看看
你加酶消化的时候,处理的东西包括水,都是无RNase的吧?
再说说 ...

首先谢谢您的回复。消化的时候都是试剂盒里的,但里面没有Rnase inhibitor,我也没有单独加。。。
14楼2012-04-25 14:38:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xumin-0120

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流! 2012-05-08 18:59:38
怎么说,首先确定你的引物扩增的序列中间有没有内含子序列,没有的话,你的RNA为模版的1号就有你所要的目的片段,如果中间没有多余内含子序列,极可能是DNA。看你的RNA电泳图效果挺好的,反转录后问题也不是很大。可能是你的引物不够特异,还是先找个内参对比下比较可靠~~动物的一般是actin,植物的就不知道了。。。。
15楼2012-05-08 16:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weining1203 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +4 曦熙兮 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:01 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 313分生物学求调剂 +6 Yyt杨1 2026-03-09 8/400 2026-03-14 03:00 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:56 by houyaoxu
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
信息提示
请填处理意见