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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 求打靶高手解决重组问题 短臂上的突变点能否被整合入基因组内

我设计了一个打靶载体,在同源断臂上设计了一段突变点(缺失了11个碱基),想请教下这个突变点能否l可以通过打靶(同源重组)被成功整合入基因组中,完成基因组的定点突变。谢谢!
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yyy_zzz

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
世外清风: 金币+2, 谢谢关注! 2012-04-20 17:23:25
你没有说明白你的整合方式,如果他是类似大肠杆菌Red重组系统那种的话,只要你的突变点在上下游同源臂之间就是可以的。
2楼2012-04-20 16:20:08
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy_zzz at 2012-04-20 16:20:08:
你没有说明白你的整合方式,如果他是类似大肠杆菌Red重组系统那种的话,只要你的突变点在上下游同源臂之间就是可以的。

我做的是动物的打靶,突变点设置在短臂上面,初衷是想通过同源重组将我的突变点引入。不知可不可以,谢谢!
3楼2012-04-20 17:22:26
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
世外清风: 金币+8, 有帮助, 谢谢呵 2012-04-20 21:32:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-04-20 17:22:26:
我做的是动物的打靶,突变点设置在短臂上面,初衷是想通过同源重组将我的突变点引入。不知可不可以,谢谢!

可以。如果你做的是整体动物还可以考虑使用条件基因敲除。
4楼2012-04-20 17:32:18
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-20 17:32:18:
可以。如果你做的是整体动物还可以考虑使用条件基因敲除。

谢谢关注呵,希望能详细点,管条件基因敲除还比较清楚,主要想请教我问的问题,谢谢美女呵!
5楼2012-04-20 21:33:24
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