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提取DNA匀浆问题
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pockyfly_520
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应助: 0
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虫号: 1544468
注册: 2011-12-20
专业: 食品科学基础
[
求助
]
提取DNA匀浆问题
请问下,提动物肌肉组织DNA时,用高速匀浆器匀浆,会不会造成DNA双链断裂成单链,提的效果如何。如果可以使用,所用的匀浆速度和时间是多少。谢谢!
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1楼
2012-04-19 17:00:45
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凌波丽
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专业: 生物大分子结构与功能
管辖:
生物科学综合
【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助,欢迎丽美眉常来
2012-04-29 15:31:23
提动物肌肉组织DNA时,用高速匀浆器匀浆,会不会造成DNA双链断裂成单链,如果转速高,你该考虑DNA会因为剪切力而被切断,但不是变为单链。我建议你还是尽量把高速匀浆器匀浆转速降低,能够切碎肌肉组织就行,或者用剪刀剪碎肌肉组织。然后用SDS/酚法提取为好,10mg/mL蛋白酶K溶液,裂解缓冲溶液:1mol/LTris-HCl(pH=8.0),5mol/LNaCl,0.5mol/LEDTA,10%SDS。
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2楼
2012-04-28 23:02:22
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