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pockyfly_520

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取DNA匀浆问题

请问下,提动物肌肉组织DNA时,用高速匀浆器匀浆,会不会造成DNA双链断裂成单链,提的效果如何。如果可以使用,所用的匀浆速度和时间是多少。谢谢!
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助,欢迎丽美眉常来 2012-04-29 15:31:23
提动物肌肉组织DNA时,用高速匀浆器匀浆,会不会造成DNA双链断裂成单链,如果转速高,你该考虑DNA会因为剪切力而被切断,但不是变为单链。我建议你还是尽量把高速匀浆器匀浆转速降低,能够切碎肌肉组织就行,或者用剪刀剪碎肌肉组织。然后用SDS/酚法提取为好,10mg/mL蛋白酶K溶液,裂解缓冲溶液:1mol/LTris-HCl(pH=8.0),5mol/LNaCl,0.5mol/LEDTA,10%SDS。
2楼2012-04-28 23:02:22
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