| 查看: 1682 | 回复: 10 | |||
[求助]
RNA 提取
|
|||
| 大家好，我昨天做了大鼠心脏的总RNA 提取，在测紫外时A260只有0.02左右。而且A260/A280达到2.2了。以前提取肝脏时，同样的操作A260都是大于0.1的，有没有哪位遇到过类似的情况或知道原因是什么，3Q |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生物 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有197人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
超然渡陈
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 4
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 1174.9
- 帖子: 127
- 在线: 41.7小时
- 虫号: 1110016
- 注册: 2010-09-28
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hbpxh: 金币+10 2012-04-19 22:21:18
感谢参与，应助指数 +1
hbpxh: 金币+10 2012-04-19 22:21:18
| A260/A280只能大概反应你提取产物的纯度，A260反应你提取产物的浓度，一般用紫外分光光度计测定RNA浓度，用电泳检测RNA的完整性和纯度。假如电泳结果显示有很严重的基因组或者蛋白质污染，那个紫外分光光度计测的浓度也就没意义了。紫外测浓度和电泳测纯度和完整性这两个最好都做一下。浓度低有很多原因的：组织量过大而加入的TRIzol量不够，虽然你组织很多，但有效裂解的并不多；操作时间耗费太多，RNA会严重降解；提取RNA所使用的耗材被RNAse污染会导致降解；在加入氯仿离心之后吸取上清为了保证不吸到中间层而损失太多上清；RNA量很多，但溶解时加入的DEPC处理水太少，导致部分RNA没有溶解。 |
4楼2012-04-19 16:35:37
cheng_xiao
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 3645.2
- 帖子: 273
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1553648
- 注册: 2011-12-27
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2012-04-19 15:51:00
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
3楼2012-04-19 16:23:30
孙启亮
金虫 (著名写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 121 (高中生)
- 贵宾: 0.216
- 金币: 2881.3
- 散金: 2546
- 红花: 23
- 沙发: 19
- 帖子: 2792
- 在线: 677.4小时
- 虫号: 1112263
- 注册: 2010-10-01
- 性别: GG
- 专业: 前寒武纪地质学
5楼2012-04-19 17:20:16
seahow
木虫 (著名写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1691.1
- 红花: 1
- 帖子: 1778
- 在线: 65.2小时
- 虫号: 78970
- 注册: 2005-07-07
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
6楼2012-04-19 17:26:45
谢谢 7楼2012-04-19 22:13:25
今天又做了一次，结果还是不好，郁闷
8楼2012-04-19 22:17:43
wansanlian
金虫 (小有名气)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 1586.8
- 散金: 29
- 红花: 1
- 帖子: 274
- 在线: 74.3小时
- 虫号: 1062391
- 注册: 2010-07-22
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
9楼2012-04-20 00:20:23
dovekaoyan
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2116.9
- 散金: 88
- 帖子: 900
- 在线: 88.1小时
- 虫号: 474576
- 注册: 2007-12-06
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
10楼2012-04-20 09:49:06
5