查看: 2572  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

renlu0521

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于土壤细菌分离鉴定的知识,希望朋友帮忙解答

我要从土壤中分离和鉴定出未知的菌(细菌或真菌均存在),求助怎样设计实验方案,怎样的一个实验思路也行。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangasen

新虫 (初入文坛)

未知菌鉴定比较困难吧
9楼2015-03-25 15:41:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

renlu0521

新虫 (初入文坛)

还有想请问一下,目前培养基上划线生长的至少有两种细菌,可以不分离直接做PCR鉴定吗?或者具体要怎样分离纯化进行鉴定呢?
2楼2012-04-17 20:43:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
renlu0521: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2012-04-17 22:11:50
renlu0521: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2012-04-18 22:35:35
1.你是否是从土壤中筛选新菌种?如果是筛选新菌种的话,那这个还是有一定难度的,要用特殊的培养基进行针对性的筛选,比如筛哪类菌找对应的培养基,当然有的培养基是秘方了,如果你实验室有做过的就直接用现成的方法即可。
2.如果你是做土壤可培养微生物分析的话,那么你考虑你的样点是否有特殊性,比如低温,高温,高盐等情况,也是针对性的选用几种培养基进行筛选。如果是普通的土壤,那么用几种常用的培养基比如牛肉膏蛋白胨for细菌,高氏一号for放线菌,孟加拉红培养基for真菌等进行筛选。
3.针对你后来提的问题,培养基上至少有两种菌,你最好还是划线分离纯化一下,镜检是否是单菌再进行PCR鉴定,当然一般划线分离1-2次挑取单菌落也可以。分离纯化的方法就是划线分离了(这个百度一下就知道了),鉴定就看你是什么菌了,细菌的话用16S通用引物(27f,1492r),真菌的话用18S通用引物(ITS1,ITS4)扩增后送测。
不知道我是否说清楚了,相互交流
處世樹為模,本固任從枝葉動;立身錢作樣,內方還要外邊圓。
3楼2012-04-17 20:54:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renlu0521

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by WSW_Alone at 2012-04-17 20:54:32:
1.你是否是从土壤中筛选新菌种?如果是筛选新菌种的话,那这个还是有一定难度的,要用特殊的培养基进行针对性的筛选,比如筛哪类菌找对应的培养基,当然有的培养基是秘方了,如果你实验室有做过的就直接用现成的方 ...

您好~非常感谢帮忙,但是还是有几个不大明白的地方(根据您提出的三个方面)
1.目前是有两种土壤样品。不知道其中可能含有那种菌种,但目前可以确定的是一定有病原菌。由于我们实验室不是研究这方面的,现在有点茫然。目前也只用了PDA培养基和牛肉膏蛋白胨培养基进行初步筛选。。。也不知道对不对
主要的目的就是讲土壤样品中主要的病原菌进行分离,并鉴定出所属种属。
2.如上所说,土壤是病害土壤,目前只用了以上两种培养基(另外PDA培养基中加入了硫酸链霉素抑制细菌和放线菌生长,我也知道并不能抑制所有细菌。。但是目前师兄给的实验思路是这样的就照做了)
3.目前还只进行了第一次的划线培养。。。主要是考虑多种菌的问题。。所以不大明白需要划线培养到怎样的程度进行PCR检测

以上,非常感谢您的帮忙~~结束后会补上金币,谢谢您~~
4楼2012-04-17 22:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯,如何抉择 +5 Isak0320 2026-10-12 7/350 2026-10-12 18:03 by 有人要害朕
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +3 好运来~9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见