[求助] TA克隆为什么总是假阳性啊？ 已有1人参与

26楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-04-18 12:25:15:
这和T载体新不新没有关系，质量好的T载体要求自连率很低，一般小于5%。我那时也是用的新买的载体，但也是始终是假阳性。没办法，换了一家公司的，一次成功。

26楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-04-18 12:25:15:
这和T载体新不新没有关系，质量好的T载体要求自连率很低，一般小于5%。我那时也是用的新买的载体，但也是始终是假阳性。没办法，换了一家公司的，一次成功。

34楼: Originally posted by to-be at 2012-04-19 18:20:24:
1. 请楼主阅读使用Taq酶的说明书，看是否加A。
2.连接T的体系中PCR产物的浓度很重要，回收后要检测在再用。
3.检测手段的问题，扩不出菌液PCR可以怀疑引物的问题，体系的问题，因为没有对照。可以将克隆摇起来提 ...

33楼: Originally posted by 另一个天堂 at 2012-04-19 16:48:19:
1.蓝白斑筛选中平板问题  有没有加X-gal
2.感受态细胞问题  有没有失活，化学转化还是电转
3.T载体连接问题  连接时间，温度

31楼: Originally posted by 跳跳鱼 at 2012-04-19 15:35:13:
怎么会这样  那你的转化效率也太高了  不可能

38楼: Originally posted by to-be at 2012-04-19 18:31:21:
不知道楼主的质粒和片段大小，如果很相近的，可以适当调整连接体系比例。