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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆为什么总是假阳性啊? 已有1人参与

我这一阵在做TA克隆,切胶回收的片段条带很清晰,但是每次连接都是假阳性或者是连不上,这是什么原因呢,求助啊!

切胶回收后的条带



第二个孔为目的条带,后面为菌落PCR结果,求解
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by kabuqinuo89 at 2012-04-17 17:12:02:
挑了好几个,都不是很好,不过我的PCR 产物都放了段时间,没有立即做连接,可以考虑一下

平时放在-20 应该没问题
快乐奋斗,创造所有。
32楼2012-04-19 15:36:52
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 欢迎斑斑常来啊~ 2012-04-16 21:22:42
kabuqinuo89: 金币+1 2012-04-17 17:14:11
你有没有做一步加A的操作呀?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好孩子!
2楼2012-04-16 18:18:52
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang8826857 at 2012-04-16 18:18:52:
你有没有做一步加A的操作呀?

我是用的Taq酶,应该不用再加A吧,不过我打算明天再加一下A试试
3楼2012-04-16 21:30:43
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by kabuqinuo89 at 2012-04-16 21:30:43:
我是用的Taq酶,应该不用再加A吧,不过我打算明天再加一下A试试

哦,用的taq酶呀,那就不用加A啦。可能是连接的时间不够?而且连接的温度不能高于25度,你用的是什么T载体?takara的吗?
好孩子!
4楼2012-04-16 22:57:26
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