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liu58yeying金虫 (小有名气)
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[求助]
关于酶的问题，有一些常识问题，但隔行如隔山啊！
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我从一个植物中提取出两个三萜类化合物，一个三萜环上有一个葡萄糖，量还比较多，另一个正好是它的苷元，但量很少。我想做一个酶解反应，把葡萄糖从三萜苷上水解下来，就在sigma公司买了杏仁来源的葡萄糖苷酶，但没有成功。 想问一下，同样是beta-葡萄糖苷酶，来源不用，比如从杏仁或是大肠杆菌，有什么区别啊，我是不是要买不同来源的葡萄糖苷酶，然后筛选啊，总会有一种来源的酶可以水解我的化合物吧！ 如果一直找不到合适的酶，我能不能试图从我提取的植物那里提取出它专有的葡萄糖苷酶啊，不过我完全没有提取酶的基础。。 |
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2楼2012-04-16 19:05:53
sanmiancxh
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【答案】应助回帖
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liu58yeying: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-17 09:15:46
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liu58yeying: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-17 09:15:46
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首先，你确定是那个酶对你的底物不起作用？而不是反应条件不合适或是检测产物的手段有问题？这个必须弄清楚，要不找多少酶都没用 白花冤枉钱 另外，酶是有专一性的 与底物的结合位点不同 而且有外切的 内切的 同样是糖甘酶 也许对别的大直链的大分子切得挺嗨 就是对你的底物不来电呢 你要买的话最好能找到那些和你的植物来源相似的 或是底物结构较为近似的 这样成功的几率高些 实在不行的话，提酶也不是不可以 你可以试试先从植物组织中弄些提取液，注意提取过程中别让酶失活了，可以多试几种手段 确定有活性 能弄出你想要的酶，再想办法分离纯化 |
3楼2012-04-17 00:24:25
zx6291
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【答案】应助回帖
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(1) 查一下文献，是否已有报道哪种酶水解你的底物三萜苷或其结构类似物，确认酶的类型和来源； （2）如果没有的话，可以买几种不同来源的糖苷酶，然后做一下筛选啊。 （3）植物组织提取破碎液，看看是否有反应发生，如果活力低的话，做一下蛋白浓缩。 |
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liu58yeying4楼2012-04-17 09:18:12
liu58yeying
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5楼2012-04-17 13:11:04
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