24小时热门版块排行榜    

查看: 2681  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot实验技术

刚开始煮蛋白会起泡泡,溢出正常么?还有我的目的蛋白是75KD我250mA的电流转膜一个半小时可以将目的蛋白转过去么?显影的时候我的内参条带很好,但是目的蛋白没有,是什么原因?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flownaway

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-05-20 18:33:47
有没有可能是抗体失效,稀释得太稀,或者蛋白的表达量不够?显影液使用太久效果也会变差
12楼2012-05-19 23:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

sxwsp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 15:28:36
内参45左右,而你的蛋白75,应该不是转膜的问题。一个班小时足够了。目的蛋白没有显影的最大可能就是抗体,抗体不行或者孵抗条件不对
2楼2012-04-22 13:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellolin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 15:28:52
煮样冒泡正常啊,用封口膜封好就行了。另外想知道转膜有没有问题直接点个预染marker,看看预染marker转的效果不就知道了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

scienceguy
3楼2012-04-22 22:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellolin at 2012-04-22 22:57:47:
煮样冒泡正常啊,用封口膜封好就行了。另外想知道转膜有没有问题直接点个预染marker,看看预染marker转的效果不就知道了。

先谢谢啦,我用了预染marker,marker 都转过去了的。现在,目的条带有显出来,但是很淡,而且背景很高,今天延长了封闭时间和降低了二抗浓度,背景市有所降低,但是目的条带变的更淡了,不知道是不是二抗的特异性不好呢?
4楼2012-05-10 23:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学336分求调剂 +5 zbzihdhd 2026-03-15 6/300 2026-03-18 04:34 by anny19840123
[考研] 301求调剂 +6 yy要上岸呀 2026-03-17 6/300 2026-03-17 23:58 by 星空星月
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +8 曦熙兮 2026-03-15 8/400 2026-03-17 20:31 by xilongliang
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 9/450 2026-03-17 10:29 by xujiaoszu
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
信息提示
请填处理意见