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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同一个平板上挑的两个菌测序，序列差很多，大家帮我看看啊，有比对图！谢谢啦
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cheng_xiao at 2012-04-11 09:13:31:
我觉的就是连接上的东西本身不一样，这你不用纠结，正常，再说了，你比对的结果相似性还是很高的，相似性大于70%就可以判定是同一类基因，也许你扩增时把假基因（假基因无处不在，菌类较少）一同扩增出来了，恰好 ...

基因的功能区域，这个就太高深了吧？着实不懂！
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11楼2012-04-12 12:23:46
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励热心交流~几个帖子一起授予EPI一枚~ 2012-05-31 09:29:31
陈年芬芳: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-31 10:36:41
好吧，其实很简单啊，假基因说白了就是长得和正常基因没什么不同，但不行使功能，不行使功能的原因有多种，其中一种可能就是正常基因突变造成的，正常基因突变后，其本身功能发生大的变化，生物体本身会检测到，然后就命令此基因不表达了，此基因就变成了假基因储存在基因组内，以备后用（现在条件下基因产物不能用不代表以后生物体不用），现在生物体内尤其是高等生物体内，假基因的数量数量
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我努力我奋斗我成功
12楼2012-04-12 15:59:03
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
陈年芬芳: 金币+1, ★有帮助 2012-05-31 10:37:01
非常多，生物体内还有很多别的基因，说白了就是进化的结果，你要是感兴趣就多看一点基础知识，很有用的，呵呵
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我努力我奋斗我成功
13楼2012-04-12 16:03:33
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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你需要的目的基因片段里有没有内切酶识别的序列？
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14楼2012-05-30 19:20:57
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yingyangyang

木虫 (正式写手)
★ ★
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-05-31 09:29:45
要么是你导入的片段有污染或者带有其他不是你想要的片段也导入成功了，成了阳性克隆，你挑出来了。
一般克隆都不会选两个来送测序，我做都是前面克隆多挑十来个，做酶切验证，然后选取一个送测序。  不知道你用的是什么载体，是否对于你挑选阳性克隆有影响。
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15楼2012-05-30 20:47:43
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 09:29:54
陈年芬芳: 金币+1, ★有帮助 2012-05-31 10:38:12
这个有可能，比如反应体系里面有杂带乱连，PCR出错，多挑几个只要有对的就行了。
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16楼2012-05-30 22:02:30
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by yingyangyang at 2012-05-30 20:47:43
要么是你导入的片段有污染或者带有其他不是你想要的片段也导入成功了，成了阳性克隆，你挑出来了。
一般克隆都不会选两个来送测序，我做都是前面克隆多挑十来个，做酶切验证，然后选取一个送测序。  不知道你用的是 ...

我觉得这个可能性最大了，但是如果这样的话，仍然阳性的的就直接测序了，没有做酶切啊。
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17楼2012-05-31 10:41:18
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yingyangyang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2012-05-31 10:41:18
我觉得这个可能性最大了，但是如果这样的话，仍然阳性的的就直接测序了，没有做酶切啊。...

我们一般会做个没切验证下片段导入的大小和正确位置，因为我们想要导入的片段大小一般是固定的，所有根据酶切片段的大小可以判断插入片段的大小，同是可以进一步确认片段插入位点的正确性。因为插入位点若不正确，酶切后片段大小很正确插入位点的酶切结果是不一样的。
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18楼2012-06-02 23:12:17
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okxjl
19楼2014-04-16 15:30:28
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