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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 制备色谱，平头峰，异常峰形 计算分离度的疑问
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libaoguo

铁杆木虫 (小有名气)

匆匆过客

[求助] 制备色谱，平头峰，异常峰形 计算分离度的疑问

最近使用层析柱分离混糖的时候，流出曲线的峰形不是通常的“高斯”型的，而是有点平头峰，顶点位置确认的不是很准确，请问这种情况下怎么准确计算分离度？哪位大侠知道的，请帮帮忙！若峰形有点拖尾或前沿，使用通常的峰间距除以峰底宽的加和，是否还准确……
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日子，开始充实起来了
1楼 2012-04-07 21:31:31
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-04-08 08:46:39
制备色谱，一定要计算分离度吗？制备色谱出平头峰很正常，不影响分离效果就OK，个人感觉不必在这个问题上过于纠结
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梦想、激情、灵感、体验--che
2楼2012-04-08 08:43:38
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rose.no.9

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢，欢迎交流！ 2012-04-08 09:09:29
制备时出平头峰是比较正常的，是因为该组分的含量或者浓度在柱子中量大而集中，所以被检测器检测到一直处于最高吸收值处，就是平头的原因。至于后面计算分离度的问题，因为本人实验不涉及那方面，所以还请其他高手解答吧。祝你好运！
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3楼2012-04-08 09:05:42
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libaoguo

铁杆木虫 (小有名气)

匆匆过客
引用回帖:
3楼: Originally posted by rose.no.9 at 2012-04-08 09:05:42:
制备时出平头峰是比较正常的，是因为该组分的含量或者浓度在柱子中量大而集中，所以被检测器检测到一直处于最高吸收值处，就是平头的原因。至于后面计算分离度的问题，因为本人实验不涉及那方面，所以还请其他高手 ...

感谢你的回答。
其实我这个装置不是直接连接检测器来检测含量，而是在出口定时取样，然后用HPLC分析含量，绘制流出曲线的，所以不存在检测器处于最高吸收值的问题。所以才困惑......
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日子，开始充实起来了
4楼2012-04-08 20:55:12
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libaoguo

铁杆木虫 (小有名气)

匆匆过客
引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-04-08 08:43:38:
制备色谱，一定要计算分离度吗？制备色谱出平头峰很正常，不影响分离效果就OK，个人感觉不必在这个问题上过于纠结

但是有的时候，譬如筛选树脂、筛选操作参数等，都要以分离度来作为判断的依据。这时候就是必须要计算了......但是平头峰的话，两峰间距，比较难以准确测量。分离效果的评价，不就是通过分离度吗
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日子，开始充实起来了
5楼2012-04-09 11:32:23
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GC6890N

至尊木虫 (职业作家)

将

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-22 20:27:23
一般不需要提供分离度数据。上样量的大小对制备色谱的峰形有极大影响，为了提高制备效率，加大上样量到柱子和分离的耐受限度是通常的做法，这时计算分离度无意义了。
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gc
6楼2012-04-09 19:43:00
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libaoguo

铁杆木虫 (小有名气)

匆匆过客
引用回帖:
6楼: Originally posted by GC6890N at 2012-04-09 19:43:00:
一般不需要提供分离度数据。上样量的大小对制备色谱的峰形有极大影响，为了提高制备效率，加大上样量到柱子和分离的耐受限度是通常的做法，这时计算分离度无意义了。

但是，在有些文献中，设计SMB之前，要进行树脂、操作参数的筛选，此时就是通过分离度来作为判断的依据的啊。我指的是针对混糖的分离。
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7楼2012-04-09 20:05:06
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perfectshit

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2012-04-22 16:15:22
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