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七AND七

银虫 (小有名气)

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[交流] 做过多糖除蛋白的请进已有17人参与

最近在做海藻多糖的结构分析，其中要对粗多糖除蛋白，选择Sevag方法，但是发现重复了几次之后再加Sevag试剂剧烈振摇后还是呈乳白色状态，分液漏斗没办法分离只能高速离心才能分离而且还发现水层越来越少了……请问这是什么原因？我都怀疑那些是不是都是糖蛋白而没有多糖啊！

除蛋白时多糖液浓度是不是应该烯一点有利于蛋白的出去？或者还有什么更有效率的方法？

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1楼 2012-04-02 18:13:19

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引用回帖:

9楼: Originally posted by zhxl81920 at 2012-04-05 17:04:08:
氯仿和正丁醇的比例，以及与多糖的比例，搅拌大概30min后分液漏斗静置一段时间，中间的是变形的蛋白层分液可以除去。或者用酶处理后透析，也有有三氯乙酸的，可以试试你的样品那个比较合适。

你好！加了Sevag试剂后是用搅拌子搅拌么不用在分液漏斗中剧烈振摇么？我振摇了之后呈白色状态，我想是乳化了。然后我又去离心看看，结果就只有两层（上层多糖，下层就全部是白色的）没看到所谓的变性蛋白。搅拌时间一定要很长么？我差不多就一两分钟。酶解后可以直接透析能除掉蛋白么？