| 查看: 2915 | 回复: 8 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
分成分，过硅胶柱，求指导！
|
||||
|
取乙酸乙酯部位60g进行硅胶柱层析，层析柱（8cm×110cm），20倍量硅胶（200-400目）。洗脱剂为不同比例的二氯甲烷-丙酮。二氯甲烷-丙酮（100:1）部分经重结晶得化合物Ⅰ（8.4mg）；二氯甲烷-丙酮（50:1）部分得化合物Ⅱ粗品（131.9mg），经再次硅胶柱层析，流动相用石油醚-丙酮（3:1）得纯化合物Ⅱ（26mg）；二氯甲烷-丙酮（20:1）部分得化合物Ⅲ粗品（18mg），经再次硅胶柱层析，流动相用石油醚-丙酮（4:1）得纯化合物Ⅲ（1.6mg）；二氯甲烷-丙酮（15：1）部分经重结晶得化合物Ⅳ纯品（52mg），化合物Ⅴ纯品（11.5mg）；二氯甲烷-丙酮（5:1）部分经重结晶得化合物Ⅵ（38.8mg）；二氯甲烷-丙酮（3:1）部分经再次硅胶柱层析，流动相用三氯甲烷-甲醇（15:1）得化合Ⅶ纯品（25.7mg），该部分洗脱物经重结晶后得化合物Ⅷ纯品（8.6mg）。 （流程图已附） 我想按照上述过程来过硅胶柱，主要要得到化合物Ⅳ纯品，化合Ⅶ纯品，第一次做，有一些问题不了解，求指教！ （1）上述的过程是梯度洗脱得到的，我只想得到化合物Ⅳ纯品和化合Ⅶ纯品， 请问我可以直接用 二氯甲烷-丙酮（15：1）洗脱后再用二氯甲烷-丙酮（3:1）洗脱嘛？这样会不会不纯，还是要先点板子看看？如果跑板子是一个点，就能说明是一个物质吗？ （2）二氯甲烷-丙酮（15：1）部分经重结晶得化合物Ⅳ纯品（52mg），化合物Ⅴ纯品（11.5mg）为什么这个比例跑出来是两个物质，这是怎么样一个情况？怎么分开这两个物质？ （3)上述过程中的重结晶是怎么操作的？ （4）湿法装柱，该用什么溶剂拌硅胶呢？为什么我以硅胶和溶剂1:1的比例拌硅胶，感觉硅胶还是干的，无法装入柱子里呢。上次我们用二氯甲烷装柱，拌不湿，多加了之后硅胶成半透明状流体，可装入柱中，但是觉得太稀了没法上样，把它放置了一段时间后，柱子变成一小段是硅胶一小段是溶剂，这样相互间隔着。 （5）过这样一个硅胶柱，要多长时间呢，怎么来区分一个成分是否出完全了？很多化合物为无色，应该看不到色带吧？还是一个比例只能洗脱一个成分，用薄层检测那里面还有没有那个成分了嘛？ （6）如果硅胶柱洗脱需要几天，那晚上一般要怎么办啊？继续洗脱，怎么加洗脱剂，怎么接洗脱下来的东西呢？ 请大家不吝赐教哈！帮帮初学者！  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 我的实验与情感 |
» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
明天应该可查了！？
已经有5人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有7人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
人气不行了
已经有10人回复
-
我面上完蛋了
已经有10人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有24人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有17人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 过硅胶柱时压力和溶剂流速哪个对物质分离度影响大一些？
已经有3人回复
- 过硅胶柱时流动相出错了
已经有17人回复
- 乙酸乙酯部分上硅胶柱该选用什么洗脱剂？
已经有13人回复
- 聚合物过硅胶柱
已经有13人回复
- 盐类物质硅胶柱能分开吗
已经有5人回复
- 什么物质容易在硅胶柱上分解
已经有5人回复
- 【求助】ODS反相硅胶柱分离苯乙醇苷类物质怎么分啊？
已经有10人回复
- 【求助】HF板上行展开3.5cm，Rf=0.29和0.34斑点圆外切的两组分能一次硅胶柱层析分离吗
已经有7人回复
- 【求助】利用干法上样时，与待分离的样品混合所用的硅胶是过柱硅胶还是铺板用的硅胶？
已经有13人回复
- 【讨论】硅胶柱的径高比
已经有8人回复
5楼2012-03-28 18:11:02
我也不懂 求指教 2楼2012-03-27 22:32:42
3楼2012-03-27 22:45:18
★ ★ ★
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-03-28 19:57:16
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-03-28 19:57:16
|
1.洗脱剂直接这样跳，后面处理很难的，最好能慢点过渡。跑板子用两种以上溶剂系统展开都是一个点的话，差不多是一个东西，纯度还是要用HPLC检测的。 2.这是很有可能的，两个化合物洗脱下来的时间不一样，后面结晶的溶剂系统也可能不一样，要根据文献和预实验自己摸索，找出最佳的。 3.重结晶看书吧，很详细的。呵呵呵 4.用多点溶剂是没问题的，多了就从下面放掉嘛！损失点溶剂而已。后面一段硅胶一段溶剂就对啦！但硅胶层不能断层或有裂纹哦，否则影响分离效果的。 5.小柱子一般一天左右冲完吧，大柱子一般一个星期左右。最好有液相跟踪监测，跑板子最好浓缩一下，要不太稀不好看到结果。一个比例能冲出很多成分的，有的一个比例能把你要的全冲下来，做多了就知道了。做与实验也好。 6.硅胶柱最好快点冲，因为硅胶有死吸附作用，时间久了样品损失大，晚上能轮班的话最好，不行就自己调流速，慢点滴，不要停，柱子上可以加个加液球，晚上多加点洗脱剂，晚上过夜要好好计算滴速和柱子上的洗脱剂。 一开始是比较懵的，做做就好了。加油 |
4楼2012-03-28 11:26:50
20