| 查看: 2971 | 回复: 8 | ||||
[交流]
分成分，过硅胶柱，求指导！
|
|
取乙酸乙酯部位60g进行硅胶柱层析，层析柱（8cm×110cm），20倍量硅胶（200-400目）。洗脱剂为不同比例的二氯甲烷-丙酮。二氯甲烷-丙酮（100:1）部分经重结晶得化合物Ⅰ（8.4mg）；二氯甲烷-丙酮（50:1）部分得化合物Ⅱ粗品（131.9mg），经再次硅胶柱层析，流动相用石油醚-丙酮（3:1）得纯化合物Ⅱ（26mg）；二氯甲烷-丙酮（20:1）部分得化合物Ⅲ粗品（18mg），经再次硅胶柱层析，流动相用石油醚-丙酮（4:1）得纯化合物Ⅲ（1.6mg）；二氯甲烷-丙酮（15：1）部分经重结晶得化合物Ⅳ纯品（52mg），化合物Ⅴ纯品（11.5mg）；二氯甲烷-丙酮（5:1）部分经重结晶得化合物Ⅵ（38.8mg）；二氯甲烷-丙酮（3:1）部分经再次硅胶柱层析，流动相用三氯甲烷-甲醇（15:1）得化合Ⅶ纯品（25.7mg），该部分洗脱物经重结晶后得化合物Ⅷ纯品（8.6mg）。 （流程图已附） 我想按照上述过程来过硅胶柱，主要要得到化合物Ⅳ纯品，化合Ⅶ纯品，第一次做，有一些问题不了解，求指教！ （1）上述的过程是梯度洗脱得到的，我只想得到化合物Ⅳ纯品和化合Ⅶ纯品， 请问我可以直接用 二氯甲烷-丙酮（15：1）洗脱后再用二氯甲烷-丙酮（3:1）洗脱嘛？这样会不会不纯，还是要先点板子看看？如果跑板子是一个点，就能说明是一个物质吗？ （2）二氯甲烷-丙酮（15：1）部分经重结晶得化合物Ⅳ纯品（52mg），化合物Ⅴ纯品（11.5mg）为什么这个比例跑出来是两个物质，这是怎么样一个情况？怎么分开这两个物质？ （3)上述过程中的重结晶是怎么操作的？ （4）湿法装柱，该用什么溶剂拌硅胶呢？为什么我以硅胶和溶剂1:1的比例拌硅胶，感觉硅胶还是干的，无法装入柱子里呢。上次我们用二氯甲烷装柱，拌不湿，多加了之后硅胶成半透明状流体，可装入柱中，但是觉得太稀了没法上样，把它放置了一段时间后，柱子变成一小段是硅胶一小段是溶剂，这样相互间隔着。 （5）过这样一个硅胶柱，要多长时间呢，怎么来区分一个成分是否出完全了？很多化合物为无色，应该看不到色带吧？还是一个比例只能洗脱一个成分，用薄层检测那里面还有没有那个成分了嘛？ （6）如果硅胶柱洗脱需要几天，那晚上一般要怎么办啊？继续洗脱，怎么加洗脱剂，怎么接洗脱下来的东西呢？ 请大家不吝赐教哈！帮帮初学者！  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 我的实验与情感 |
» 猜你喜欢
梦想
已经有7人回复
-
学科评审组评审是指会评吗？
已经有4人回复
-
面上合作单位盖章
已经有8人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有15人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有14人回复
-
小白求助 投论文要求的highlights应该如何写
已经有4人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有12人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有6人回复
-
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有11人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 过硅胶柱时压力和溶剂流速哪个对物质分离度影响大一些？
已经有3人回复
- 过硅胶柱时流动相出错了
已经有17人回复
- 乙酸乙酯部分上硅胶柱该选用什么洗脱剂？
已经有13人回复
- 聚合物过硅胶柱
已经有13人回复
- 盐类物质硅胶柱能分开吗
已经有5人回复
- 什么物质容易在硅胶柱上分解
已经有5人回复
- 【求助】ODS反相硅胶柱分离苯乙醇苷类物质怎么分啊？
已经有10人回复
- 【求助】HF板上行展开3.5cm，Rf=0.29和0.34斑点圆外切的两组分能一次硅胶柱层析分离吗
已经有7人回复
- 【求助】利用干法上样时，与待分离的样品混合所用的硅胶是过柱硅胶还是铺板用的硅胶？
已经有13人回复
- 【讨论】硅胶柱的径高比
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【征稿中！】2026年机械、制造技术与材料国际会议 (MEMTM 2026)
+1/897
-
【IEEE列表会议征稿 】2026年第六届控制理论与应用国际会议（ICoCTA 2026）
+5/865
-
云南大学丁军桥团队2027年博士招生
+1/811
-
基金高中！
+1/594
-
优质男征女友
+1/469
-
昆明理工大学智能车辆技术团队招聘博士后
+3/219
-
double accept!!
+5/200
-
【以色列理工学院全额奖学金硕博士招生】王燕课题组 · 柔性生物界面实验室
+2/116
-
天平合规性问题
+1/92
-
锡基钙钛矿｜超低水氧惰性环境，解锁无铅光伏技术攻关路径
+1/92
-
南方科技大学刘科院士团队诚聘矿物浮选分离方向研究助理
+1/83
-
山东大学-山东字节信息智能技术实验室2026年招聘博士后
+2/22
-
评职称需要，卖发明专利了:D有技术储备需求的设备厂商可联系
+1/19
-
浙江大学物理高等研究院袁怀洋课题组诚聘博士和博士后
+1/15
-
中国药科大学陈达威课题组招收2027年博士研究生 （药理学）
+1/10
-
义翘神州推出全长p-Tau217蛋白，助力阿尔茨海默病下一代生物标志物检测开发
+1/5
-
南方科技大学环境科学与工程学院陈洪副教授课题组2026年科研助理招聘启事
+1/4
-
联合培养学生招聘-硕博均可
+1/2
-
义翘神州TR-FRET激酶检测试剂盒助力高通量药物筛选
+1/1
-
义翘神州TR-FRET激酶检测试剂盒助力高通量药物筛选
+1/1
我也不懂 求指教 
2楼2012-03-27 22:32:42
3楼2012-03-27 22:45:18
★ ★ ★
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-03-28 19:57:16
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-03-28 19:57:16
|
1.洗脱剂直接这样跳，后面处理很难的，最好能慢点过渡。跑板子用两种以上溶剂系统展开都是一个点的话，差不多是一个东西，纯度还是要用HPLC检测的。 2.这是很有可能的，两个化合物洗脱下来的时间不一样，后面结晶的溶剂系统也可能不一样，要根据文献和预实验自己摸索，找出最佳的。 3.重结晶看书吧，很详细的。呵呵呵 4.用多点溶剂是没问题的，多了就从下面放掉嘛！损失点溶剂而已。后面一段硅胶一段溶剂就对啦！但硅胶层不能断层或有裂纹哦，否则影响分离效果的。 5.小柱子一般一天左右冲完吧，大柱子一般一个星期左右。最好有液相跟踪监测，跑板子最好浓缩一下，要不太稀不好看到结果。一个比例能冲出很多成分的，有的一个比例能把你要的全冲下来，做多了就知道了。做与实验也好。 6.硅胶柱最好快点冲，因为硅胶有死吸附作用，时间久了样品损失大，晚上能轮班的话最好，不行就自己调流速，慢点滴，不要停，柱子上可以加个加液球，晚上多加点洗脱剂，晚上过夜要好好计算滴速和柱子上的洗脱剂。 一开始是比较懵的，做做就好了。加油 |
4楼2012-03-28 11:26:50
5楼2012-03-28 18:11:02
顶到首页 6楼2012-04-04 15:45:12
daisy212475
新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-04-05 08:24:19
豆哥: 金币-49, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2012-05-17 08:16:06
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-04-05 08:24:19
豆哥: 金币-49, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2012-05-17 08:16:06
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2012-04-04 21:00:27
★ ★
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-04-05 08:24:26
云飞暖落(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-04-05 08:24:26
|
本帖内容被屏蔽 |
8楼2012-04-05 02:37:56
9楼2015-07-20 19:06:10
投票:
