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小猫三两只

金虫 (正式写手)

[求助] 套叠PCR

我想把基因内部的一段序列突变掉,采用套叠PCR的方法,两段PCR回收的大小分别为1400bp和200bp左右,但将这两段回收产物混合后作模板进行套叠,却怎么也扩不出目的带,请问是什么原因啊?我是大概按照浓度比1:1混合的,并且也试过不同体积的混合,结果都是一样,片段在250bp稍往上一点
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很可能是引物设计的问题....不知道你要删去的片段有多大(几个氨基酸还是大片段),还有你删去片段的具体方法...所以原因不太好说。
6楼2012-03-28 13:32:28
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