应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于MVLN-assay 中对照组 荧光值背景高的问题
81/1返回列表
查看: 2432  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

addison7805

金虫 (小有名气)

[求助] 关于MVLN-assay 中对照组 荧光值背景高的问题

各位大侠好，我刚接触细胞实验，就是在MVLN-assay中，用雌二醇诱导MVLN细胞，而（E2）暴露组的化学发光检测值不理想，文献中一般是7倍到10倍，而我做的是3倍到5倍，实验过程发现背景值即对照的化学发光也特别高，达到300000，而实验组1nME2所得化学发光值大约为1000000.想知道为什么背景值高，为什么诱导倍数达不到文献中的7-10倍？PS:正常情况下，对照组背景值应该是30000~50000，而我的是300000。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-26 22:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

addison7805

金虫 (小有名气)
有童鞋 大虾帮忙么？？？？？？
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-27 20:13:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
顶下~
回复此楼
3楼2012-03-28 10:17:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

addison7805

金虫 (小有名气)
。。。。。。。。。。。。。。。。。
4楼2012-04-01 21:23:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chord

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
帖都发到这来了啊，再做做就可以出结果，国内很少用这个细胞的，是吧ZLZ
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-03 10:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
6楼2012-04-03 15:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjian251

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
addison7805: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-04-03 21:31:18
你好！我也在做luc.诱导实验。自己做的稳转细胞株。
虽然我没用过此细胞，但还是冒然给出了些建议，仅供参考：
我感觉在整个实验过程中，很多因素都会影响最终的萤光信号。
首先需要明确的是：你用的细胞是别人用成熟了的细胞（必须是稳定转染的，若是顺转的则质粒可能拷贝数变了），严格按照别人的protocol是可以得到相应结果的，至少大差不差的。
若严格按照别的protocol做了，但结果有差异，想必一些环节没有注意：
1.细胞计数不够准确（当然了，现行的方法只有更准确，没有最准确），铺板细胞数目难以接近protocol里的；建议买个好点的全自动计数器；
2.细胞培养基需用无血清、去激素、无酚红的吧；
3.铺板或E2暴露之前应该要48h左右的无血清无激素培养基饥饿培养，暴露时间要控制好；
4.板子：最好用全黑板（减少假阳性），全白板最为常用；尽量不用壁不透明而底透明的板子；
5.仪器：用的检测仪器会影响结果的。promega的仪器最好且最灵敏（背景值可减去）；Berthold的专门测化学发光的也可以【以上仪器我都用过，并比较过的】；但是诸如MD的M5就差很多了，因为其检测模块设计不专业，不能准确记录各孔数据，孔间干扰显著！总之，专业的单纯检测化学发光的仪器应该都可以的。
6.提示，不论阳性还是阴性对照，坚决不能少！
多思考一下做的每个环节，推测一下，应该会找到问题的。
祝你实验顺利！   顺便问一句：此细胞株可否相赠或转卖？
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-03 16:07:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

addison7805

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hanjian251 at 2012-04-03 16:07:42:
你好！我也在做luc.诱导实验。自己做的稳转细胞株。
虽然我没用过此细胞，但还是冒然给出了些建议，仅供参考：
我感觉在整个实验过程中，很多因素都会影响最终的萤光信号。
首先需要明确的是：你用的细胞是别人 ...

谢谢你哈，你说的这些问题，我都注意了，完全是按照说明书上进行操作的。但是对照组的背景就是高，以前做过实验的师兄也不知道怎么回事。另外，我是在别的老师下面借用他们的细胞，听师姐说细胞是老板从国外带回来的。好像是仅供组内人员使用的，所以很不好意思。不能赠与或转卖。
赞一下 回复此楼
8楼2012-04-03 21:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 addison7805 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 304求调剂 +5 小熊joy 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:07 by peike
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 0805，333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭