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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 沸水提取植物多糖,分离困难

求助:
采用沸水提取植物根皮,茎皮,叶。提取液茎超滤,去掉了分子量小于5000的分子,然后冷冻干燥后,直接上离子交换树脂,用0-1.5M NaCl梯度洗脱,很难洗下来(目标成分多糖)。请问各位前辈,可能原因及解决方案,非常感谢啊。
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

引用回帖:
13楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-27 08:30:51:
弱弱问一句,为什么选用离子交换树脂呢?你的糖不带电荷吧?我觉得可以选用凝胶柱。

离子交换树脂可以用在多糖的脱色和脱蛋白上,当然有的多糖也带电荷,比如分子中含有葡萄糖醛酸的多糖,常用DEAE纤维素进行初步的纯化。
当然凝胶柱在多糖分离方面是最常用的。
边学边问,才有学问。
14楼2012-03-27 10:09:19
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普通回帖

gujinwang

木虫 (正式写手)


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-03-25 11:03:01
你可以用醇水提取,可能会引入一些极性小的杂质

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2012-03-25 10:56:29
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fjamigo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-03-25 15:48:47
fengzshang: 金币+2 2012-04-11 17:01:56
fengzshang: 金币+2 2012-05-16 01:37:21
应该用80度的水提取才可以啊,然后脱蛋白,脱盐,上大孔也可以啊
3楼2012-03-25 12:15:35
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fjamigo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-03-25 15:48:43
fengzshang: 金币+2 2012-04-11 17:02:03
fengzshang: 金币+2 2012-05-16 01:37:29
我们实验室的那位同学是先检测了多糖的含量,用的是苯酚硫酸法,分离用的是凝胶,然后用GPC做的检测
4楼2012-03-25 12:16:52
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monkey514

至尊木虫 (知名作家)

多重人格的虫子

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-03-25 15:48:57
fengzshang: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-11 17:02:13
fengzshang: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-05-16 01:37:39
为什么用树脂分呢?我感觉你的洗脱剂最好是拿Sephadex G系列的凝胶进行分离,你最好先用液相测定一下分子量在选择相应的凝胶型号,我那时候就是这么分离的,效果很好,祝楼主顺利
所谓男朋友:比自己高12公分,能公主抱,无论是不是高富帅都疼你、舍得在你身上花钱,有上进心,能讨好你妈、超越你爸,经得起诱惑不轻易被妹子拐跑,看你哪儿.
5楼2012-03-25 12:34:56
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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gujinwang at 2012-03-25 10:56:29:
你可以用醇水提取,可能会引入一些极性小的杂质

我们用沸水提取的目的就是模拟中药煎煮,然后研究其中的多糖。但沸水提取的杂质太多,糖含量只有10%不到。
6楼2012-03-25 16:21:34
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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fjamigo at 2012-03-25 12:15:35:
应该用80度的水提取才可以啊,然后脱蛋白,脱盐,上大孔也可以啊

现在国外老板叫我直接上,效果不好,用脱盐柱洗了之后,上样效果依然不好啊
7楼2012-03-25 16:22:38
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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by monkey514 at 2012-03-25 12:34:56:
为什么用树脂分呢?我感觉你的洗脱剂最好是拿Sephadex G系列的凝胶进行分离,你最好先用液相测定一下分子量在选择相应的凝胶型号,我那时候就是这么分离的,效果很好,祝楼主顺利

现在我估计是沸水提取物其他杂质太多,影响分离效果,我们是用的ANX 4 fast flow,阴离子交换树脂。
8楼2012-03-25 16:24:38
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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fjamigo at 2012-03-25 12:16:52:
我们实验室的那位同学是先检测了多糖的含量,用的是苯酚硫酸法,分离用的是凝胶,然后用GPC做的检测

我们测了多糖含量了,大约10%,目前想法是先有离子交换树脂分离后再用凝胶,可现在就是离子交换树脂效果不好,很难分离。
9楼2012-03-25 16:26:08
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liu200479

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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leecius: 金币+1, 谢谢帮助。 2012-03-26 08:11:02
fengzshang: 金币+1, 有帮助 2012-04-11 17:02:29
水提醇沉法,好要脱蛋白,脱色素浓缩
10楼2012-03-26 07:56:15
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