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萝莉胖

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白分离,Sephadex分子量的选择

各位大侠好,小弟用大肠杆菌表达一蛋白,his tag纯化。最后过完Ni柱,SDS-PAGE检测,有两条带,一条是目的蛋白40KD,一条是100KD的his本底蛋白。一般这种情况如何分离这两种蛋白,用Sephadex可以吗,分子量如何选择?

谢谢各位!
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

先试一下离子交换层析柱吧,只要等电点相差1个单位,就可以分离得很好了,凝胶过滤柱也可以试一下,两个蛋白质的分子量都处于G200的分离范围内。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-03-24 00:12:50
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