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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相谱分离时遇到的问题，求指点
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woshixinren

银虫 (小有名气)

[求助] 液相谱分离时遇到的问题，求指点

用超高效液相，梯度洗脱，甲醇和缓冲盐（10mmol，0.3%甲酸）比例从95:1到35:65，洗脱时间六分钟，发现峰后仰，而且很宽。大家觉得什么原因？
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1楼 2012-03-19 19:04:55
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
padodo: 金币+2, 感谢应助！ 2012-03-19 21:45:41
个人认为是 梯度变化引起的基线向上漂移。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-03-19 20:06:59
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woshixinren

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-19 20:06:59:
个人认为是 梯度变化引起的基线向上漂移。

能具体一点儿吗？我是个新手，谢谢
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3楼2012-03-19 20:24:47
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by woshixinren at 2012-03-19 20:24:47:
能具体一点儿吗？我是个新手，谢谢

梯度的变化，很容易使基线向上漂，即漂移。这时候出峰，峰型会随漂移大小而发生不同程度的变化。
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woshixinren
守候在风中的宁静。
4楼2012-03-19 20:28:21
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
padodo: 金币+2, 感谢应助！ 2012-03-19 21:45:50
你是什么样品，用的是什么模式的分离，反相吗？你的比例95:1是什么比什么，是有机相为1吗？你的样品水溶性怎么样？如果你的样品水溶性不是很好，而你起步的有机相含量很低，有可能造成样品的溶解问题，形成你说的前伸峰。建议你用起始流动相溶解样品。
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5楼2012-03-19 20:31:47
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woshixinren

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zly86 at 2012-03-19 20:31:47:
你是什么样品，用的是什么模式的分离，反相吗？你的比例95:1是什么比什么，是有机相为1吗？你的样品水溶性怎么样？如果你的样品水溶性不是很好，而你起步的有机相含量很低，有可能造成样品的溶解问题，形成你说的 ...

是我写错了，水相是99.是反相的，样品在水和甲醇里都易溶。
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6楼2012-03-19 21:20:21
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woshixinren

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-19 20:28:21:
梯度的变化，很容易使基线向上漂，即漂移。这时候出峰，峰型会随漂移大小而发生不同程度的变化。

谢谢
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7楼2012-03-19 21:22:19
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by woshixinren at 2012-03-19 21:20:21:
是我写错了，水相是99.是反相的，样品在水和甲醇里都易溶。

你用的是什么柱子？极性C18柱吗？为什么这么低的有机相起步？你用什么溶的样品啊。我以前用跟起始流动相差异较大的溶剂溶样的时候就容易出现这种情况，严重的时候还会分裂成两个峰
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8楼2012-03-20 07:57:06
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yamei0926

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为你在走梯度洗脱，梯度洗脱时每一个时间柱子内流动相组分的比例是在变化的，所以你的基线会漂移，峰就会拖尾、后仰。当然楼上的说法都是有道理的，我支持。
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9楼2012-03-20 08:36:37
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30716875

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以不进样
走一次梯度看看基线怎么样

还有梯度完后要设置一个初始浓度5min
让柱子平衡
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10楼2012-03-20 08:38:12
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