24小时热门版块排行榜    

查看: 2094  |  回复: 20

woshixinren

银虫 (小有名气)

[求助] 液相谱分离时遇到的问题,求指点

用超高效液相,梯度洗脱,甲醇和缓冲盐(10mmol,0.3%甲酸)比例从95:1到35:65,洗脱时间六分钟,发现峰后仰,而且很宽。大家觉得什么原因?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
padodo: 金币+2, 感谢应助! 2012-03-19 21:45:41
个人认为是 梯度变化引起的基线向上漂移。
守候在风中的宁静。
2楼2012-03-19 20:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshixinren

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-19 20:06:59:
个人认为是 梯度变化引起的基线向上漂移。

能具体一点儿吗?我是个新手,谢谢
3楼2012-03-19 20:24:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by woshixinren at 2012-03-19 20:24:47:
能具体一点儿吗?我是个新手,谢谢

梯度的变化,很容易使基线向上漂,即漂移。这时候出峰,峰型会随漂移大小而发生不同程度的变化。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

守候在风中的宁静。
4楼2012-03-19 20:28:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zly86

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
padodo: 金币+2, 感谢应助! 2012-03-19 21:45:50
你是什么样品,用的是什么模式的分离,反相吗?你的比例95:1是什么比什么,是有机相为1吗?你的样品水溶性怎么样?如果你的样品水溶性不是很好,而你起步的有机相含量很低,有可能造成样品的溶解问题,形成你说的前伸峰。建议你用起始流动相溶解样品。
5楼2012-03-19 20:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshixinren

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zly86 at 2012-03-19 20:31:47:
你是什么样品,用的是什么模式的分离,反相吗?你的比例95:1是什么比什么,是有机相为1吗?你的样品水溶性怎么样?如果你的样品水溶性不是很好,而你起步的有机相含量很低,有可能造成样品的溶解问题,形成你说的 ...

是我写错了,水相是99.是反相的,样品在水和甲醇里都易溶。
6楼2012-03-19 21:20:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshixinren

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-19 20:28:21:
梯度的变化,很容易使基线向上漂,即漂移。这时候出峰,峰型会随漂移大小而发生不同程度的变化。

谢谢
7楼2012-03-19 21:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zly86

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by woshixinren at 2012-03-19 21:20:21:
是我写错了,水相是99.是反相的,样品在水和甲醇里都易溶。

你用的是什么柱子?极性C18柱吗?为什么这么低的有机相起步?你用什么溶的样品啊。我以前用跟起始流动相差异较大的溶剂溶样的时候就容易出现这种情况,严重的时候还会分裂成两个峰
8楼2012-03-20 07:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yamei0926

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
因为你在走梯度洗脱,梯度洗脱时每一个时间柱子内流动相组分的比例是在变化的,所以你的基线会漂移,峰就会拖尾、后仰。当然楼上的说法都是有道理的,我支持。
9楼2012-03-20 08:36:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

30716875

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以不进样
走一次梯度看看基线怎么样

还有梯度完后要设置一个初始浓度5min
让柱子平衡
10楼2012-03-20 08:38:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 woshixinren 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 305分求调剂(食品工程) +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +3 幸运的酱酱 2026-03-22 4/200 2026-03-22 15:06 by allen-yin
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
请填处理意见