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wuhuiwolf

新虫 (初入文坛)

[求助] 梯度洗脱,出现平头鬼峰(SDS)

液相条件:agilent 二元泵,梯度洗脱,其中缓冲液配制方法如下:
缓冲液=(7.8g NaH2PO4+4ml 三乙胺+1.2g 十二烷基硫酸钠,加水至1000ml,调pH3.0)/乙腈(90/10)

        乙腈: 缓冲液
0min         28         72
5min         28         72
45min       58          42
50min       28           72
60min       28          72
该条件下,在约30.5min出现鬼峰,且一直出现(进空白溶剂、样品等均出现),如图,波长260nm,流速:1.0ml/min,柱温35摄氏度,色谱柱:C18 5 um 250×4.6mm。
最开始使用此机器和色谱柱时,并未出现如此情况。随后出现了鬼峰。怀疑系统污染,因此采用异丙醇,0.2ml/min冲洗系统(未接色谱柱)过夜,并不断进样异丙醇,第二天更换成进样系统,仍然出现相同的鬼峰。采用10%乙腈冲洗系统(连接色谱柱,0.2ml/min),冲洗48h(一个周末,并未进样),周一后更换成进样系统,仍然出现相同的鬼峰。
换机器waters 、换一根色谱柱同样出现相同问题,重新配制流动相,也出现相同问题。以水重复进样,均出现相同情况,且峰面积大小不变。请问解决方法。


[ Last edited by wuhuiwolf on 2012-3-18 at 15:02 ]
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yurong818

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

6楼2012-03-19 12:39:19
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查看全部 13 个回答

408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多用纯甲醇或者乙腈冲洗系统
奋斗是金!
3楼2012-03-18 19:24:37
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zxwcn

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主不必纠结,走梯度经常会出现鬼峰,作为本底峰不积分就好了。
4楼2012-03-18 19:34:13
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


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soundhorizo: 金币+1, 感谢应助 2012-03-19 08:53:05
可能是滤膜的问题。近期发现使用津腾的滤膜,出现鬼峰。。。。
如果不过滤,直接进空白水溶液,试试看。
守候在风中的宁静。
5楼2012-03-19 08:28:15
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