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yilishanshan

木虫 (正式写手)


[交流] 紫外-分光光度法测定含量时,有必要每次都做标准曲线吗

分光光度法测定含量时,有必要每次都做标准曲线吗
前几天做的标准曲线,再拿来用不行吗?
既然都有了个线性范围,后来做出的吸光度值,只要在范围内,为何不能根据之前的标曲读出浓度值呢!
每做一次试验,随行做一个标准,感觉有点浪费对照哦
想不通呀,请高手赐教,万分感激!


我做的是总黄酮,好像不太稳定!
但对照品、样品都需要显色,最后反应时间是15~20min,一次差不多要处理十几个,从第一个开始测,到最后一个时间早过了最佳反应时间。
能否先显色测定标曲的5个点和5个样品,仪器不关,再去显色处理剩下的10个样品,再测定!后面的10个样品用之前的标曲?

[ Last edited by yilishanshan on 2012-3-14 at 23:11 ]
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line333

铁杆木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-16 08:50:45
样品太多,显色后待测定时间已过了最佳时间!针对这个,其实可以把实验样品显色的时间错开来,让每个样品的显色放置的时间较为接近,没人说要一次性让几十个样一起显色!

若不想做标曲,可以取样同深度的标液测定,若吸光度无明显变化,则可用原标曲;若偏移值较大,需重做!
15楼2012-03-16 08:39:45
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泡泡-211

至尊木虫 (知名作家)


★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
中药2000(金币+1): 谢谢交流。 2012-03-14 11:39:29
如果你对你所建立的含量测定方法进行过方法学验证,并满足要求,就可以不用每次都做标曲,直接用就可以了
2楼2012-03-13 22:07:08
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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
中药2000(金币+2): 谢谢交流。 2012-03-14 11:40:01
标曲必须每次都得做。因为仪器自身的性能会影响到标曲的。这个你做个实验就看出来了。
当然了,如果你就想凑合着用以前的标曲也行,那得看你样品的稳定性之类的因素。碰上在溶液中放一年也不变化的,还行。碰上生物样品的话,你还在是每次做含量测定前,老老实实的做一下标曲。
3楼2012-03-14 09:21:35
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bourne47

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-16 08:49:28
你能保证比色皿不被着色?
4楼2012-03-14 11:10:06
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