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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 紫外-分光光度法测定含量时，有必要每次都做标准曲线吗
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

[交流] 紫外-分光光度法测定含量时，有必要每次都做标准曲线吗

分光光度法测定含量时，有必要每次都做标准曲线吗
前几天做的标准曲线，再拿来用不行吗？
既然都有了个线性范围，后来做出的吸光度值，只要在范围内，为何不能根据之前的标曲读出浓度值呢!
每做一次试验，随行做一个标准，感觉有点浪费对照哦
想不通呀，请高手赐教，万分感激！


我做的是总黄酮，好像不太稳定！
但对照品、样品都需要显色，最后反应时间是15~20min，一次差不多要处理十几个，从第一个开始测，到最后一个时间早过了最佳反应时间。
能否先显色测定标曲的5个点和5个样品，仪器不关，再去显色处理剩下的10个样品，再测定！后面的10个样品用之前的标曲？

[ Last edited by yilishanshan on 2012-3-14 at 23:11 ]
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1楼 2012-03-13 21:38:37
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line333

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-16 08:50:45
样品太多，显色后待测定时间已过了最佳时间！针对这个，其实可以把实验样品显色的时间错开来，让每个样品的显色放置的时间较为接近，没人说要一次性让几十个样一起显色！

若不想做标曲，可以取样同深度的标液测定，若吸光度无明显变化，则可用原标曲；若偏移值较大，需重做！
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15楼2012-03-16 08:39:45
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泡泡-211

至尊木虫 (知名作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
中药2000(金币+1): 谢谢交流。 2012-03-14 11:39:29
如果你对你所建立的含量测定方法进行过方法学验证，并满足要求，就可以不用每次都做标曲，直接用就可以了
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2楼2012-03-13 22:07:08
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
中药2000(金币+2): 谢谢交流。 2012-03-14 11:40:01
标曲必须每次都得做。因为仪器自身的性能会影响到标曲的。这个你做个实验就看出来了。
当然了，如果你就想凑合着用以前的标曲也行，那得看你样品的稳定性之类的因素。碰上在溶液中放一年也不变化的，还行。碰上生物样品的话，你还在是每次做含量测定前，老老实实的做一下标曲。
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3楼2012-03-14 09:21:35
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bourne47

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-16 08:49:28
你能保证比色皿不被着色？
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4楼2012-03-14 11:10:06
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