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slowlyhuan

铜虫 (初入文坛)


[交流] 分离纯化粘蛋白,给些建议呗

要分离纯化贝类粘蛋白,选取层析柱分离,如何能提高分离液的浓度以便后序分析呢?如果没有标准品,那么这个分离纯化要如何鉴定?分离后的纯蛋白(含有洗脱液)如何鉴定其结构呢?(初步涉及分离纯化,菜鸟一枚,望不吝赐教)
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CDJ520

新虫 (小有名气)


★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
粘蛋白是神马?是很有粘性的蛋白吗?
3楼2012-03-14 09:26:12
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kading

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
\这个好复杂的,你看你是由目标蛋白还是没有目标蛋白,如果没有的话你就在上柱子之前,选择一个合适的pH或者盐浓度,沉淀一部分蛋白,然后上柱子纯化,将纯化的蛋白做质朴分析,MALDI-TOF-MS或者N短测序或者LC-MS(-MS/MS)检测,就可以匹配出你的分离的蛋白;你的目标蛋白名字知道以后,基本上蛋白苦力就有结构,晶体结构哦~~
4楼2012-03-14 12:39:44
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slowlyhuan

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
楼: Originally posted by CDJ520 at 2012-03-14 09:26:12:
粘蛋白是神马?是很有粘性的蛋白吗?

生物粘合剂,在手术方面具有很好的生理功能
5楼2012-03-15 08:32:55
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slowlyhuan

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
楼: Originally posted by kading at 2012-03-14 12:39:44:
\这个好复杂的,你看你是由目标蛋白还是没有目标蛋白,如果没有的话你就在上柱子之前,选择一个合适的pH或者盐浓度,沉淀一部分蛋白,然后上柱子纯化,将纯化的蛋白做质朴分析,MALDI-TOF-MS或者N短测序或者LC-MS ...

这么说如果没有标准品,就不能用HPLC,就需要做质谱分析呀。沉淀杂蛋白貌似要很复杂,我试试,谢谢回复!
6楼2012-03-15 08:36:18
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