6楼: Originally posted by amq7392 at 2012-03-15 08:52:28:
重装过几次，都是这种情况，柱床塌陷，流速变得很慢，三四秒一滴。跑出来的峰都是这样：一个很低很宽的大峰。线性梯度太缓会不会导致峰变宽呢？梯度陡一些会不会改善峰形？

10楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-03-15 11:43:12:
平衡是要几倍柱体积的，是不没有平衡过来啊，确定上样前平衡液的ph是目的ph？

11楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-15 12:52:40:
请问你的目标蛋白的等电点多少，你用的缓冲液的PH是多少，一般离子交换的ph和等电点相差一个ph

13楼: Originally posted by amq7392 at 2012-03-15 13:02:42:
文献中报道的这种酶的等电点从4点几到6点几不等，不同菌种产的酶是不太一样的，我也不清楚我的酶等电点多少。我开始用pH6.5的磷酸缓冲液，发现穿透峰有酶活，挂柱不牢，故改为pH8.0的Tris-HCl。

14楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-15 13:10:35:
先把等电点弄清楚了吧，这样的话你摸条件的时候也容易点

17楼: Originally posted by 狐狸尾巴 at 2012-03-15 14:51:52:
目的蛋白是不是发酵所得？

19楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-03-15 15:01:24:
感觉是填料的问题，换试试，要不2m氢氧化钠再生一下