| 查看: 2684 | 回复: 28 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
amq7392铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
求教离子交换柱纯化蛋白的问题
|
|
|
本人用DEAE Sepharose FF纯化一种酶，柱子为1.6X30cm，柱床高约20cm，上样缓冲液20mM Tris-HCl，用0—0.5M NaCl梯度洗脱，流速约2ml/min。问题是：在整个梯度洗脱过程中仅出现一个很大的峰，峰高A280不到0.02，但特别宽，三四个小时才出完，经检测酶活，我的目标产物就存在于整个峰中。我重复了两三次，都是这种情况，请问这是怎么回事？是我装柱有问题还是洗脱条件有问题？还有就是，当梯度完后，高盐洗脱时（1M NaCl），柱床高度下降明显，有两三个厘米，这是怎么回事呢？谢谢各位！ [ Last edited by amq7392 on 2012-3-13 at 19:24 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
-
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？
已经有3人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有6人回复
-
2026博士申请-功能高分子，水凝胶方向
已经有6人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有4人回复
-
硕士和导师闹得不愉快
已经有13人回复
-
请问2026国家基金面上项目会启动申2停1吗
已经有5人回复
-
同一篇文章，用不同账号投稿对编辑决定是否送审有没有影响？
已经有3人回复
lzgxgz
至尊木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 12539.5
- 红花: 3
- 帖子: 905
- 在线: 357.4小时
- 虫号: 1561045
- 注册: 2012-01-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
感觉是填料的问题，换试试，要不2m氢氧化钠再生一下
19楼2012-03-15 15:01:24
2楼2012-03-14 21:32:20
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2130
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3296
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-03-14 22:30:15
lzgxgz
至尊木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 12539.5
- 红花: 3
- 帖子: 905
- 在线: 357.4小时
- 虫号: 1561045
- 注册: 2012-01-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2012-03-15 08:46:51