| 查看: 2786 | 回复: 28 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
amq7392铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
求教离子交换柱纯化蛋白的问题
|
|
|
本人用DEAE Sepharose FF纯化一种酶，柱子为1.6X30cm，柱床高约20cm，上样缓冲液20mM Tris-HCl，用0—0.5M NaCl梯度洗脱，流速约2ml/min。问题是：在整个梯度洗脱过程中仅出现一个很大的峰，峰高A280不到0.02，但特别宽，三四个小时才出完，经检测酶活，我的目标产物就存在于整个峰中。我重复了两三次，都是这种情况，请问这是怎么回事？是我装柱有问题还是洗脱条件有问题？还有就是，当梯度完后，高盐洗脱时（1M NaCl），柱床高度下降明显，有两三个厘米，这是怎么回事呢？谢谢各位！ [ Last edited by amq7392 on 2012-3-13 at 19:24 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有10人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有3人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有26人回复
-
2026年机械制造与材料应用国际会议 （ICMMMA 2026）
已经有4人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有6人回复
-
Cas 72-43-5需要30g，定制合成，能接单的留言
已经有8人回复
-
北京211副教授，35岁，想重新出发，去国外做博后，怎么样？
已经有8人回复
-
自荐读博
已经有3人回复
-
不自信的我
已经有5人回复
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2140
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3298
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
11楼2012-03-15 12:52:40
2楼2012-03-14 21:32:20
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2140
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3298
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-03-14 22:30:15
lzgxgz
至尊木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 12539.5
- 红花: 3
- 帖子: 905
- 在线: 357.4小时
- 虫号: 1561045
- 注册: 2012-01-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2012-03-15 08:46:51